你知道細胞胞內染色操作流程是什么嗎？讓我們一起來看看吧！
一、細胞計數
將培養好的細胞收集于15mL離心管并計數；500g離心4min，去上清。
二、制備單細胞懸液
將收集的細胞用1mL 0.5%BSA/PBS溶液重懸，400g離心3min，去上清，重復2次；用0.5%BSA/PBS溶液重懸細胞至濃度1x106個細胞/mL，分配到96孔板中，每孔100μl細胞懸液，400g離心5min去上清。
三、固定
每孔加入100μl細胞固定劑重懸細胞，2-8°孵育20min。
四、洗滌
400g離心5min，去上清后加入200μl 0.5%BSA/PBS溶液重懸，離心去上清，重復兩遍。
每孔加入100μl細胞通透劑重懸細胞，室溫孵育20min。
400g離心5min，去上清后加入200μl 0.5%BSA/PBS溶液重懸，離心去上清，重復兩遍。
五、阻斷Fc受體
10-20min。
六、一抗孵育
每孔加入稀釋后的一抗溶液100μl，2-8℃反應30min。
七、洗滌
400g離心5min，去上清后加入200μl 0.5%BSA/PBS溶液重懸，離心去上清，重復兩遍。
八、二抗孵育
對于非熒光染料直標抗體，加入100μl熒光二抗重懸，避光2-8℃反應30min。對于直標抗體直接跳到步驟九。
九、洗滌
400g離心5min，去上清后加入200μl 0.5%BSA/PBS溶液重懸，離心去上清，重復兩遍。
十、上機分析
用200μl 0.5%BSA/PBS溶液重懸細胞，4℃保存，上機分析。
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