流式細胞分選抗體選擇的基本條件:目標蛋白特異性,反應種屬以及應用實驗。流式抗體熒光標記的方式包括直接標記和間接標記兩種。在流式實驗過程中,盡量減少實驗工序和過程,以保證實驗的真實和準確性。因此在條件允許的范圍內,建議盡量用直接標記的抗體進行實驗而不去做間接標記。
如果同時檢測多個指標:確認流式細胞儀能檢測多少個通道,流式抗體每個通道只能選擇1種熒光素。各個通道之間的熒光素可以隨意搭配。如實驗者同時檢測三個指標,可以適當的選擇一個熒光素標記,FITC、PE和PE-cy5。切忌所有指標選擇同一個通道的熒光標記,以防止熒光的重疊和相互干擾,影響結果。因此,流式細胞儀的通道越多,同一份樣本能同時做的表面/胞內標志就越多。
流式細胞分選抗體使用注意事項:
1.流式使用申請者可提前5天電話預約或者到中山大學醫學院科技樓北806預約,至少提前一天預約。
2.預約時說明:制備的樣品細胞的種類、細胞的大小、熒光標記的情況(幾種熒光染色,熒光染料的激發波長和發射波長,需要的目的細胞)
3.樣品請按時制備好,如果超過預約時間20min還沒制備好,則取消本次預約時間段的使用,或者由下一個客戶頂上。
4.每天預約的客戶要提供無菌的生理鹽水,生理鹽水的提供量我們會根據客戶的樣品數確定。
5.對于細胞分選的用戶需提供樣品收集的流式管(Cat:352054),流式管中裝上4/5體積的培養基。
6.流式使用完成后,用戶清理實驗過程中用完的物品,以保持流式房的衛生。
7.Copy數據時,請自帶光盤(CD/DVD),嚴禁未經允許使用優盤拷數據。
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