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   八角茴香油中茴香腦的含量--氣相色譜GC5890內標法測定
                                                     ——南京科捷分析儀器有限公司
八角茴香油中茴香腦的含量氣相色譜GC5890內標法測定方法：
       采用氣相色譜內標法，以萘為內標，測定八角茴香油中茴香腦的含量。結果：茴香腦在4．12—32。96btg范圍內呈良好的線性關系，加樣回收率為96．28％，RSD=1．o9％。結論：氣相色譜內標法簡便、準確，重現性好，可作為茴香油的質量控制方法之一。
     八角茴香油為木蘭科植物八角茴香Illicium vcrttm Hook．f．的新鮮枝葉或成熟果實經水蒸汽蒸餾得到的揮發油，具有芳香調味及健胃作用，是廣西的特產中藥。
 
一、儀器與試藥
    GC-5890氣相色譜儀，N2000   工作站。
    茴香腦對照品（trans—Anetho1）[由美國Sigma公司提供，lot：S16146—453，含量99％ （GC）]；萘（分析純，含量99％）；醋酸乙酯（分析純）；八角茴香油對照藥材（由中國藥品生物制品檢定所提供，批號1545—200001）；八角茴香油樣品（桂林市維威制藥有限公司產品，批號：030501、030502、030503、 030601、030602、030603、030604、030701、030702、030703）。

二、方法與結果
      1 色譜條件填充色譜柱：以聚乙二醇（PEG）一20M和硅酮（OV—l7）為固定液，涂布濃度分別為10％和2％，涂布后的載體以7：3的比例（重量比）裝入同一柱內（PEG在進樣口端），長度為2m；程序升溫：柱子初始溫度100℃，保持5min；以4℃／min升至140℃，保持5min，以l0℃／min升至200℃ ，保持5min；進樣口溫度：250℃；檢測器：FID，溫度250％；載氣N 2：60ml／min；助燃氣air：50ml／min；燃氣H2：60ml／min；進樣量：lμl。在上述色譜條件下分別進樣測定，結果表明理論板數按茴香腦峰計算不低于10 000，茴香腦峰和內標物萘均與相鄰組分色譜峰達到*分離，分離度大于1.5，茴香腦保留時間約為15min， 內標物萘保留時間約為13min。
       2 對照品溶液的制備 精密稱取茴香對照品2．06g于25ml量瓶中，以醋酸乙酯溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為茴香腦對照品溶液。
       3 內標溶液的制備 精密稱取萘1．26g于25 ml量瓶中，以醋酸乙酯溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為內標溶液。
       4 供試品溶液的制備 取八角茴香油0．18g，精密稱定，置10ml量瓶中，精密加入內標溶液2ml，加醋酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。材。《中國藥典》2000年版一部收載的八角茴香油標準無含量測定項目【1】。據文獻報道，八角茴香油中含茴香腦、草蒿腦、茴香醛等成分【2－5】，其中茴香腦是主要有效成分【6，7】 ，目前茴香腦的含量測定多采用氣相色譜法【2－5】，而用氣相色譜內標法測定八角茴香油中茴香腦的含量未見報道。由于氣相色譜法進樣量少，采用內標法可減少誤差，為提高方法的重現性，本文建立了氣相色譜內標法測定八角茴香油中茴香腦含量的方法，結果較為滿意，可作為該藥材質量控制的方法。
       5 線性關系的考察分別精密吸取上述對照品溶液0．5、1、2、3、4ml，分別置10ml量瓶中，各精密加入內標溶液2ml，以醋酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，按上述色譜條件，各進樣lμl，進行測定。以茴香腦峰面積積分值和萘峰面積積分值的比值y對茴香腦進樣量 進行回歸分析，得回歸方程：Y：0．07509X一0．005997．r=1．0000。表明茴香腦進樣量在4．12—32．96μg范圍內線性關系良好。
      6 校正因子的測定 精密稱取萘1．25g，置25ml量瓶中，加醋酸乙酯溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為內標溶液。精密稱取茴香腦對照品2．00g，置25ml量瓶中，加醋酸乙酯溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為茴香腦對照品溶液。精密量取上述對照溶液和內標溶液各2ml，置10ml量瓶中，加醋酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，作為標準溶液。（即lμl含茴香腦16μg；含萘10μg）。取lμl注入氣相色譜儀，連續進樣6次，按平均峰面積計算校正因子，結果校正因子為1．3154，RSD=0．15％（n=6）。
      7 精密度與重現性試驗取同一供試品溶液，連續重復進樣6次，以茴香腦峰面積積分值對萘峰面積積分值的比值計算相對標準偏差，測得平均值為1．2372， RSD =1．64％ 。精密稱取同一批樣品6份，品溶液，依法進樣測定，以茴香腦的百分含量（g／g）計算相對標準偏差，平均含量為90．60％ ， RSD =0．15％。
      8 加樣回收率試驗 精密稱取已測知含量的樣品（平均含量90．72％）0．09g于10ml量瓶中；分別精密加入茴香腦對照品溶液lml及內標溶液2ml，以醋酸乙酯稀釋至刻度，搖勻。精密吸取1 l進樣測定，計算回收率，平均回收率96．28％ ，RSD=1．09％（n=5）。
      9 樣品測定按“校正因子測定及供試品溶液的制備"項下操作制備校正因子及樣品溶液，然后分別精密吸取校正因子溶液1 l連續進樣3次，測定校正因子；精密吸取供試品溶液ltal，進樣測定2次，以內標法計算樣品中茴香腦的百分含量（g／g），各約0．18g，按2．4項方法制備供試 結果見表1。表1 樣品含量測定結果 （n=2）
  
三、討論
      目前茴香腦的含量多采用氣相色譜面積歸一法測定其相對含量，具有一定的局限性，由于氣相色譜法進樣量少，采用內標法可減少實驗誤差。提高方法的重現性，本研究結果表明，氣相色譜內標法簡便、準確、重現性好，可為八角茴香油及其制劑的質量控制方法提供參考。
 
四、以上產品GC5890氣相色譜儀及N2000工作站的來源
      以上產品CG5890氣相色譜儀及N2000工作站由南京科捷分析儀器有限公司生產， 南京科捷分析儀器有限公司是專業研究、開發、生產、氣相色譜儀、液相色譜儀、色譜配套產品及色譜零配件、易耗品的高科技型企業。公司擁有一批長期從事色譜研制開發及色譜分析應用的高工、教授，在色譜及光譜類儀品的維護、維修、和調試等方面的技術力量雄厚。
       除生產CG5890氣相色譜儀及N2000工作站外，公司還生產或提供以下產品：氣相色譜儀，液相色譜儀，離子色譜儀，質譜儀，光譜儀，色譜工作站，色譜柱，色譜柱溫箱，溶劑過濾瓶真空泵，超聲波清洗器，色譜配件，樣品瓶，白酒標樣，標準品，濁度儀，酸度計，電導率儀，干燥箱，培養箱，電爐，水質分析儀，食品安全檢測儀，色譜配件，樣品瓶，白酒標樣，標準品，色譜試劑，可見/紫外分光光度計，原子吸收分光光度計，紅外分光光度計等，鎢燈，元素燈，比色皿，打印紙，四色打印筆，噴墨頭，色譜柱，毛細管柱，填充柱，脫氧管，進樣針，進樣器，開關閥，穩流閥，穩壓閥，二手氣相色譜儀等.氣相色譜儀維修、培訓.
       除八角茴香油中茴香腦的含量分析以為，南京科捷分析儀器有限公司還擁有各種專業行業分析方案，如：室內空氣檢測（TVOC）色譜儀成套配置方案，三聚氰胺檢測配置方案，農藥殘留檢測儀器方案，煤礦安全在線系統方案等。能幫助各行各業專業人士解決各種色譜專業問題。
     
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