纖維化的定量化
■什么是纖維化?
纖維化是指組織內的結締組織發生異常增殖的現象。可發生于心臟、肺、肝臟、腎臟、胰腺等除腦部以外的全身幾乎所有主要臟器,發生纖維化的臟器最終導致功能衰竭。
發生心肌纖維化后,可能引起舒張性心衰,甚至引起心律不齊或猝死。肺部纖維化將引起間質性肺炎,使肺部間質變厚變硬,導致肺部收縮,難以吸入氧氣,在平靜狀態也有可能發生呼吸停止。肝臟的纖維化將導致肝硬化。另外,引起纖維化的纖維芽細胞還大量存在于癌間質組織內,目前正在推進其與癌癥的相關性研究。發生纖維化的臟器難以恢復原狀,因此及早發現并抑制其發展尤為重要。為評價纖維化的進展程度,正在開發利用作為標記產生的膠原蛋白或血小板數、糖鏈生物標記等方法。
另外基于對纖維化缺乏有效的治療藥物,一旦發病其結果不可逆的特點,同時也從再生醫療的觀點著手開展研究。
■纖維化機理
在正常組織中,因組織障礙發生炎癥反應后,在巨噬細胞引起免疫應答的同時,將分泌TGF-β等炎癥因子。炎癥因子可促進纖維芽細胞的增殖及向肌成纖維細胞的分化。肌成纖維細胞產生構成細胞外基質的膠原蛋白,通過供應足量的修復材料,可治愈炎癥部位。
發生慢性炎癥后,因過度的損傷修復反應,肌成纖維細胞不吸收膠原蛋白而導致沉淀,使纖維化繼續發展,最終導致臟器的功能衰竭。
■纖維化率的測量事例
在以下實例中,利用基恩士一體化熒光顯微成像系統BZ-X800,觀察心臟并測量其纖維化率。在纖維化部位觀察中,低倍率下圖像不夠清晰,無法進行高精度測量。而在高倍率下,則在不同的觀察位置,測量結果發生變化,無法進行穩定的測量。
因此,為了在保持分辨率的同時拍攝整體圖像,通過創建拼接圖像,可以穩定地獲得高精度結果。
利用細胞計數功能,能夠輕松測量纖維化發生部位占整體組織的面積率。
另外,通過保存用于測量纖維化率的測量條件,可對其他標本進行批量測量。
能夠簡單且高再現性地評價多個組織間纖維化率差異。
■如果引進一體化熒光顯微成像系統BZ-X800
· 針對無法完整進入視野的大切片,一邊移動載物臺一邊獲取圖像,將拍攝的圖像拼接起來,即可合成1張高分辨率圖像。
· 即使標本有傾斜、高低差,也能在Z方向獲取多張圖像,只從拍攝的圖像中合成焦點對準的部分,可構建焦點對準整個標本的全幅對焦圖像。
· 使用混合細胞計數,只從整個切片中提取纖維化的部分,可自動計算比例。
· 根據在混合細胞計數中使用的提取條件,使用宏細胞計數,可批量處理多個圖像。
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