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NIBSC 00/410 脊髓灰質炎病毒1型MAPREC分析
1. 預期用途
流感抗血清試劑 19/322 使用適當的 NIBSC 抗原試劑制備用于 B/Phuket/3073/2013 樣抗原的單次徑向擴散測定。
使用 B/Phuket/3073/2013 病毒的純化 HA 在綿羊 743、744、745、746、747 和 748 中制備抗血清試劑。通過用菠蘿蛋白酶處理從純化的病毒中提取 HA 抗原并通過在蔗糖梯度上沉降來純化 (Brand, CN and Skehel, JJ, Nature, New Biology, 1972, 238, 145-147。
2. 注意
NIBSC 19/322 流感抗B(國際標準品) 不適用于人類食物鏈中的人類或動物。
該材料不是人或牛來源。與所有生物來源的材料一樣,這種制劑應被視為對健康有潛在危害。應根據您自己實驗室的安全程序使用和丟棄它。此類安全程序應包括戴防護手套和避免產生氣溶膠。打開安瓿或小瓶時應小心謹慎,以免割傷。
3. 單元
沒有為該材料分配單元。
4. 內容
生物材料原產國:英國。
綿羊 743、744、745、746、747 和 748 的免疫計劃如下:肌肉內注射一劑約 100 µg 的 B/Phuket/3073/2013 病毒 HA 和弗氏*佐劑 (FCA),隨后兩周之后使用 20 微克劑量的弗氏不*佐劑 (FIA)。每周給予三劑 10 微克的 HA,包括 FIA。初次免疫后六周,收集血清并加入NaN3(0.05% w/v)。
然后通過 APHIS 批準的滅活 FMDV 方法處理抗血清。
將從綿羊 743、744、745、746、747 和 748 獲得的抗血清混合,然后用含有NaN3 (0.05% w/v) 的 PBS 緩沖液按 1:2.8 稀釋,并裝入 2ml 體積的小瓶中。
5. 存儲
NIBSC 19/322 流感抗B(國際標準品) 推薦的儲存溫度為+2-8oC。
但是,如果打算長期儲存試劑,即 > 2 年,則可以將它們儲存在 -20°C。抗血清可以冷凍和解凍,對 SRD 測定的使用沒有任何不利影響。
6. 開瓶指南
小瓶有螺帽;也可能存在內部塞子。應通過逆時針旋轉取下蓋子。應注意防止內容物丟失。請注意:如果在取下瓶蓋時有塞子,塞子應留在小瓶中或隨瓶蓋一起取下
7. 材料的使用
對于 1ml 中含有 20-50 微克 HA 活性的抗原的測定,應將大約 15-25 µl 未稀釋的試劑添加到 1ml 瓊脂糖中。根據使用的 B/Phuket/3073/2013 抗原標準或根據當地實驗室條件,可能需要更改抗血清濃度
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