一種思考二抗的新方法
Nano-Secondary 是一類新型的二級“抗體"，基于以物種和亞型特異性方式結(jié)合一抗的納米抗體（來自羊駝抗體的微小結(jié)合元件*）。這些重組抗體片段與流行的 Alexa Fluor® 染料偶聯(lián)。由于 Nano-Secondary 源自 Nanobodies，它們比傳統(tǒng)的二抗小約 10 倍。這種小尺寸能夠更好地穿透組織并減少表位和標(biāo)簽之間的距離。Nano-Secondary 以超高的親和力和特異性與其特定的目標(biāo)一抗結(jié)合，使其染色速度更快，點(diǎn)分辨率更小，非常適合具有較低背景的更清晰的圖像。目前，針對兔多克隆 IgG 和小鼠 IgG 的三種不同亞類（1、2b、

*與傳統(tǒng)抗體相比，羊駝*地表達(dá)單域抗體（sdAbs）。sdAb 僅包含重鏈，沒有輕鏈。sdAb 的重組表達(dá)抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域稱為 VHH 或納米抗體。Nano-Secondary 是與 Alexa Fluor 染料偶聯(lián)的 IgG 特異性納米抗體。

優(yōu)質(zhì)的結(jié)合帶來更清晰的圖像
納米二代是亞類特異性的，不會與來自其他常用物種的 IgG 發(fā)生交叉反應(yīng)。這種高特異性與極低的背景相結(jié)合，可以進(jìn)行具有挑戰(zhàn)性的免疫測定，例如多重蛋白質(zhì)印跡或多重超分辨率顯微鏡。即使在對小鼠血清進(jìn)行預(yù)吸附后，普遍常見的是小鼠 IgG 亞類之間存在一些交叉反應(yīng)。Nano-Secondary 消除了這種期望。

結(jié)合一抗和二抗的更快方案
一步免疫染色是同時(shí)孵育一抗和納米二抗。這是由于 Nano-Secondary 對其目標(biāo)初級 IgG 的超快和強(qiáng)結(jié)合動力學(xué)

。不需要兩個(gè)連續(xù)的孵育步驟，只需將初級 IgG 和納米二級添加在一起即可減少孵育時(shí)間和“動手"時(shí)間。同時(shí)孵育支

持多路復(fù)用、更深的組織穿透和流式細(xì)胞術(shù)的細(xì)胞染色。

自信地對您的免疫測定進(jìn)行多重檢測
Nano-Secondary 可以在多重?zé)晒獾鞍踪|(zhì)印跡或免疫熒光顯微鏡實(shí)驗(yàn)中并行應(yīng)用。這允許同時(shí)在同一個(gè)印跡或載玻

片上同時(shí)分析多個(gè)目標(biāo)。結(jié)果與傳統(tǒng)的順序協(xié)議相媲美。右側(cè)的組合圖像顯示了通過免疫熒光進(jìn)行三重染色的 HeLa 

細(xì)胞。本實(shí)驗(yàn)使用多克隆一抗（兔抗-lamin）和2個(gè)單克隆一抗（小鼠IgG1抗COX4和小鼠IgG2b抗微管蛋白）同時(shí)

染色納米二抗抗兔IgG Alexa 568（黃色），抗-小鼠 IgG1 Alexa 488（綠色）和抗小鼠 IgG2b Alexa 647（洋紅色）。

使用蛋白質(zhì)印跡多路復(fù)用，無需剝離和重新探測蛋白質(zhì)印跡膜。當(dāng)然，檢測需要使用熒光印跡閱讀器。

使用更小的二抗實(shí)現(xiàn)更精細(xì)的細(xì)節(jié)
納米二抗的大小約為傳統(tǒng)二抗的 1/10。即使在滿足地附著大量 Alexa Fluor 分子后，它的小尺寸也能更好地

穿透組織并縮短表位和標(biāo)簽之間的距離。沒有像用于超分辨率顯微鏡（例如 STED 和 STORM）的納米二抗那樣

*設(shè)計(jì)的二抗。您的實(shí)驗(yàn)室將在單重、2 重甚至 3 重染色實(shí)驗(yàn)中獲得更詳細(xì)的圖像。

駱駝科單域抗體就像類固醇上的 IgG

被稱為駱駝科的動物家族（駱駝、美洲駝和羊駝）產(chǎn)生沒有輕鏈的功能性抗體，即所謂的“重鏈"抗體。這些重鏈抗體通過單個(gè)可變結(jié)構(gòu)域識別并結(jié)合其抗原。當(dāng)從它們的羧基尾部切下時(shí)，這些桶狀結(jié)構(gòu) (2x3 nm) 非常小、天然存在且完整的抗原結(jié)合片段 (MW 為 13 kDa)。這些稱為納米抗體的片段具有高特異性、低納摩爾范圍內(nèi)的親和力和亞納摩爾范圍內(nèi)的解離常數(shù)（通常比小鼠 IgG 好 10 到 100 倍）的特點(diǎn)。納米抗體的緊湊尺寸使其在高達(dá) 70°C 的溫度下極為穩(wěn)定，即使在 2M NaCl 或 0.5% SDS 中也能發(fā)揮作用。這些小而強(qiáng)大的抗體片段可用于各種*的應(yīng)用。他們將打開您的研究可能性。