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文獻解讀 | 使用安捷倫在線液相系統實現自動化溶出測試
方案背景
根據 2020 年版《中國藥典》通則 0931 的定義，“溶出度是指活性藥物從片劑、膠囊劑或顆粒劑等普通制劑中在規定條件下的溶出速率和程度”。根據溶出度實驗結果，可以預測藥物在人體內釋放情況以及制劑中藥物成分的含量。因此，準確的溶出度測試由為重要。
在傳統溶出實驗中，每個取樣點需要手動完成樣品收集、處理及轉移，高頻率取樣過程中的手動操作面臨更嚴峻的挑戰。溶出速度快的速釋樣品，取樣時間誤差以及不同操作人員的取樣行為差異都有可能導致錯過藥物快速釋放的關鍵階段。而緩釋片劑取樣會持續 24 小時或更長時間，分析人員的長時間疲勞操作可能降低取樣準確度，增加操作失誤的風險。
如何解決這個問題呢？
圖 1. 安捷倫在線液相系統與 Flexible cube 聯機進行溶出測試示意圖
安捷倫在線液相色譜與 Flexible Cube 模塊聯用，建立了用于溶出測試的全流程自動化分析系統。該系統利用安捷倫在線液相色譜監測軟件監控并觸發 Flexible Cube 在指定時間進行溶出液過濾和樣品傳輸，定時通過流路切換將各時間點的溶出樣品轉移至在線液相色譜系統進行實時分析，使分析人員能夠實時查看溶出度或釋放度，并根據實時檢測結果及時進行制劑工藝技術調整或質量端的批次放行。
在線液相系統進行溶出檢測的應用實例
本實驗以丙戊酸鈉片劑為例，使用在線液相色譜與 FlexibleCube 聯用分別對緩釋片劑和速釋片劑進行全自動化溶出實驗。
丙戊酸鈉緩釋片劑溶出實驗
根據丙戊酸鈉緩釋片劑的釋放特性，本實驗設定 4 個取樣點（分別為 1 小時、3 小時、6 小時、12 小時），并平行進行 6 組溶出實驗。利用在線液相色譜監測軟件，根據預設的處理方法對采集的數據進行自動處理，然后統計數據并繪制溶出曲線。
表 1. 緩釋片劑溶出度結果
圖 2. 緩釋片劑溶出曲線
通過對比標準品峰面積，繪制丙戊酸鈉緩釋片劑的溶出曲線，結合溶出度測試結果，溶出時間為 1 h、3 h、6 h 和 12 h 時的平均溶出度分別為 24.9%、47.3%、71.2% 和 85.3%，表明在設定的實驗時間內，藥物最終已基本溶出，6 組實驗平行性良好，符合預期。
丙戊酸鈉速釋片劑溶出實驗
與緩釋片劑不同，根據丙戊酸鈉速釋片劑的釋放特性，設定了更密集的溶出測試取樣時間點。速釋片劑旨在快速釋放藥物，通常在 30 分鐘內釋放大部分藥物。根據速釋片劑的特點，我們在 45 分鐘內選擇了 4 個取樣點（分別為 3 分鐘、15 分鐘、30 分鐘、45 分鐘），并平行進行 6 組溶出實驗。利用在線液相色譜監測軟件，根據預設的處理方法對采集的數據進行自動處理，然后統計數據并繪制溶出曲線。
表 2. 速釋片劑溶出度結果
圖 3. 速釋片劑溶出曲線
通過對比標準品峰面積，繪制丙戊酸鈉速釋片劑的溶出曲線。結合溶出度數據可知，溶出時間為 3 min 時的溶出度為 41.7%，15 min 時的溶出度為 98.1%，且 30–45 min 的溶出度穩定保持在 98% 以上，表明在設定的實驗時間內，藥物最終已完全溶出。
結語
本實驗通過將安捷倫在線液相色譜系統與 Flexible Cube 模塊聯用，建立了用于溶出測試的全流程自動化分析系統。其中采用 CDS 軟件控制 Flexible Cube，在指定時間完成流路的選擇和溶出液的傳輸，并利用在線液相色譜系統對收集的溶出液進行實時檢測。優化實驗流程、減少人工操作并提高測試精度和效率，為各種制劑的溶出測試提供強有力的支持。同時，所開發的方案表現出良好的可擴展性和通用性，適用于其他平行反應監控等實驗場景，在藥物研發和生產中具有廣闊的應用前景。