細胞拉伸培養儀使用時為什么要倒置培養?
細胞拉伸培養儀是指需要將培養物分割成小的部分,重新接種到另外的培養器皿(瓶)內,再進行培養的過程。對單層培養而言,80%匯合或剛匯合的細胞是較理想的傳代階段。原代細胞培養:與體內原組織在形態結構和功能活動上相似性大。由于培養的細胞剛剛從活體組織分離出來,故更接近于生物體內的生活狀態。這一方法可為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段。同時也為以后傳代培養創造條件。傳代細胞培養:當原代培養成功以后,隨著培養時間的延長和細胞不斷分裂,一則細胞之間相互接觸而發生接觸性抑制,生長速度減慢甚至停止;另一方面也會因營養物不足和代謝物積累而不利于生長或發生中毒。
細胞拉伸培養儀為什么要倒置培養:
1)由于重力的作用使培養基表面及次層能富集微生物生長所需的營養物質,利于微生物生長。
2)防止空氣中微生物的污染培養基及培養物:倒置時平板內的空氣是不流動的,雜菌不會沉降到培養基表面,如果不倒置,很快平板周邊會長起雜菌。
3)倒置培養使瓊脂里水分不易蒸發出去,而充分的保持瓊脂的彈性與細菌容易繁殖和生存的環境。如果不倒置,大概3天左右培養基就會出現龜裂等水分散失的情況。 而一些落菌等試驗,需驗證培養基無菌,就要先倒置培養48小時才可作為模板做落菌,水分散失是很重要的。
原代細胞培養:將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖,這一過程稱原代培養。
傳代細胞培養:當細胞在培養瓶中長滿后就需要將其稀釋分種成多瓶,細胞才能繼續生長。這一過程就叫傳代。傳代培養可獲得大量細胞供實驗所需。傳代要在嚴格的無菌條件下進行,每一步都需要認真仔細的無菌操作。