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細胞侵襲實驗3D基質膠

應用：

•3D 細胞球體培養

•小鼠皮下成瘤

•細胞侵襲

•適合用于 3D 細胞藥物篩檢平臺

•細胞生長和分化

•代謝/毒理學研究

樣本類型：

•腫瘤細胞系、哺乳動物組織

試劑盒組分

細胞侵襲實驗準備程序

A、試劑準備:

1、C 緩沖溶液 (0.5 X) 制備 : 使用 37 ℃水浴回溫的無血清細胞培養液 (例如: 無血清 DMEM 等，用于 稀釋 A 膠) 稀釋 C 緩沖溶液 (10 X) (貨號: B-P-00002-C)至 C 緩沖溶液 (0.5 X), 即體積稀釋 20 倍。使 用前放置 37 度水浴槽。 (例如:1 mL C 緩沖溶液 (10 X) + 19 ml 無血清 DMEM; 如未使用完畢，可保存 于 4 ℃ 冰箱, 保存一周)

2、A 膠 (1X) 制備 : 將 A 膠 (2X) (貨號: B-P-00002-A) 置于 37 ℃水浴槽回溫 10 分鐘，確認*溶解。 再將 37 ℃水浴回溫的無血清細胞培養液取 0.5 mL，加至 37 ℃已溶解的 0.5 mL A 膠 (2X)，配置成 1 mL 的 A 膠 (1X)。使用前置于 37 度，可降低 A 膠黏度。(單次使用，勿重復冷凍解凍 A 膠 (1X) )

B、細胞侵襲實驗步驟

1、準備適用 24 孔板的 Transwell 裝置(例如:康寧 Transwell insert, 8 μm PET membrane)。

2、用 37 ℃已回溫的 C 緩沖溶液 (0.5 X)將 A 膠 (1X) 原液體積稀釋 5-20 倍，建議一開始可選用 15 倍。 (根據細胞種類做稀釋比例對比實驗，找出最為適合自己實驗體系的稀釋倍數，稀釋倍數越高，膠體越軟，越 容易穿透)

3、根據 Transwell 上室底部面積加入步驟 2 的 0.1 mL 稀釋后的 A 膠稀釋液到 Transwell 上室中。

4、將步驟 4 在 4 ℃ 冰箱孵育 2-3 小時。

5、在 Transwell 上室中加入 0.1 mL 無血清的細胞懸液，使細胞最終濃度約 7.5 x 104 cells/well.。

6、在 Transwell 下室中加入 0.8 mL 含 10 %血清的細胞培養液做為 chemoattractant，吸引細胞進行遷 移及分泌基質蛋白酶 (MMP) 侵襲。 (對照組為 Transwell 下室中加入含 0.8ml 無血清的細胞培養液)。

7、將細胞培養板在 37 ℃, 5 % CO2 培養箱孵育 24-48 小時。

8、移除培養液，以 PBS 清洗 2 次。

9、用棉簽輕輕擦掉上層未遷移的細胞。

10、加入 1 ml 100 % 甲醇室溫固定 30 分鐘,再以 PBS 清洗 2 次。

11、加入 1 ml 0.1 % 結晶紫染液 ( 0.1 % (g/ml) PBS 結晶紫) 室溫染色 20 分鐘，再以 PBS 清洗 2 次。

12、將 Transwell 移至載玻片上，在顯微鏡下隨機 6-9 個視野觀察計算遷移的細胞數。

細胞侵襲實驗3D基質膠特點：

1、100%植物源材料，無任何動物成分；

2、氨基酸序列100%人源化 ；

3、可調控基質膠硬度進行多種細胞培養；

4、3D培養結束后基質膠可以溫和融化，并保留3D細胞/類器官結構完整性；

5、3D細胞/類器官培養種類數量范圍更廣

6、無人畜共通病原菌或毒素風險；

7、最為適用于醫療級生物原料；

8、高活性、高純度、可融化；

9、4度運輸、4度保存；

10、2年保存時間。

B-P-00002系列基質膠可替代corning基質膠貨號：356234、356235、356237、356230、356231、354248、354263

深圳市安培生物科技有限公司是美國Biozellen公司的中國代理商。Biozellen®3D細胞培養基質膠現貨供應，經驗證可*替代BD/康寧的基質膠，來源為植物源且氨基酸序列100%人源化，無人畜共患病的病原菌或毒素污染，提供完整售后服務和技術支持。尊敬的客戶您如在訂購過程中遇到任何問題都可以與我司客戶經理聯系尋求幫助。