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一、3D基質膠細胞系細胞培養套裝（不含酚紅）產品說明

1、貨號：B-P-00002-2、B-P-00002-4、B-P-00002-10

2、規格：2ml-kit、4ml-kit 、10ml-kit

3、儲存條件：常溫運輸，4℃保存，可保存兩年

二、3D基質膠細胞系細胞培養套裝（不含酚紅）產品描述

3D細胞培養基質膠套裝是一套完整設計的微環境的3D細胞培養及相關應用試劑。易于使用、可*控制生物分子修飾和凝膠硬度，可用于多種細胞培養應用。聚合物可以快速凝膠化速度生成基質膠。

（3D基質膠材料為100%植物源材料，無動物來源）

試劑的制備

1、A Gel：將A Gel置于 37 ℃水浴中至少 10 分鐘直至*解凍。

2、C 緩沖液 (1X)：使用前用冷的無血清培養基（例如無血清 DMEM）將10X C 緩沖液新鮮稀釋至 1X C 緩沖液。（做不稀C緩沖區與PBS）

3、d緩沖液（1X） ：新鮮稀10X d緩沖用冷1× PBS至1X d緩沖之前使用。

3D 細胞培養的制備

所有步驟均在層流中進行，并按指示添加每個組分的體積比。

1. 將導熱片放在冰袋上。該片材可以快速均勻地冷卻培養板。

2. 重懸于1×10 5 ?10 7個細胞在1毫升混合物生長介質和甲凝膠在1：1成的比例。例如，在 500 m L 生長培養基和 500 m L A Gel 中重懸 1×10 5 個細胞。

注意：在適當的培養基和培養條件下培養細胞。貼壁細胞應在~80% 匯合度下培養。

3. 將培養板/培養皿放在導熱片/冰袋上。將步驟 2 中的20-40毫升細胞懸浮液混合物添加到每個孔中。所述混合物應該形成凝膠后5分鐘。注：測試凝膠形成通過輕觸凝膠用移液管尖，和膠線應收回從凝膠表面時提示無法拉出。

4. 一旦凝膠形成，加入 1mL 冷的 1X C 緩沖液以覆蓋圓頂 15分鐘。

5. 經過15分鐘溫育后，小心地取代C緩沖區與培養平臺。第二天更換培養基。

6. 將 細胞在CO 2培養箱中37°C培養7 至14 天，并用顯微鏡觀察球狀體的形成。培養基可以根據細胞正常生長的需要每隔一天更換一次。