快速鼠尾鑒別試劑盒（PCR系列）

產(chǎn)品介紹

1. 產(chǎn)品描述：

信勵(lì)致和®快速鼠尾鑒別試劑盒配備了整套的DNA粗提取及PCR擴(kuò)增體系，可直接快速地對(duì)小鼠組織（如鼠尾、鼠耳、鼠趾、肌肉等）樣本進(jìn)行PCR擴(kuò)增，無(wú)需勻漿、破碎、過(guò)夜消化、酚氯仿抽提、DNA沉淀或柱式純化等操作，操作更加簡(jiǎn)單快速。本試劑盒適用于10 kb以內(nèi)目的片段擴(kuò)增及4對(duì)引物以內(nèi)的多重PCR反應(yīng)，可用于快速基因型鑒定、小鼠基因分型等。

2. 產(chǎn)品特點(diǎn)：

（1）使用方便，試劑盒中提供的PCR擴(kuò)增體系含有染料，擴(kuò)增后可直接用于電泳檢測(cè)。

（2）兼容性好，試劑盒兼容4對(duì)引物以內(nèi)的多重PCR反應(yīng)，大大加快實(shí)驗(yàn)進(jìn)程。

快速鼠尾鑒別試劑盒（PCR系列）

使用說(shuō)明

1. 產(chǎn)品組分：

2. 儲(chǔ)運(yùn)條件：

2×鼠尾直擴(kuò)PCR預(yù)混液（含染料）于-25~-15℃保存，其余組分2~8℃保存。干冰運(yùn)輸。

3. 注意事項(xiàng)：

（1）使用組織裂解液時(shí)，需將組織全部浸沒(méi)至裂解液中以保證最佳的消化效果。

（2）PCR預(yù)混液避免反復(fù)凍融。

相關(guān)數(shù)據(jù)

1. 裂解后直擴(kuò)測(cè)試：

使用本品對(duì)樣本進(jìn)行裂解和PCR擴(kuò)增檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)設(shè)置三組平行，結(jié)果如上圖所示，擴(kuò)增條帶清晰、明亮、單一，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)有力地證明了本品中的組織裂解液對(duì)下游實(shí)驗(yàn)無(wú)不良影響，且2×鼠尾直擴(kuò)PCR預(yù)混液特異性好。

2. 多重PCR直擴(kuò)測(cè)試：

使用本品對(duì)樣本進(jìn)行多重PCR擴(kuò)增檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)設(shè)置三組平行，結(jié)果如上圖所示，擴(kuò)增條帶清晰、明亮、無(wú)雜帶，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)有力地證明了本品中的組織裂解液對(duì)下游實(shí)驗(yàn)無(wú)不良影響，且2×鼠尾直擴(kuò)PCR預(yù)混液擴(kuò)增效率高，特異性好，兼容性廣。

常見(jiàn)問(wèn)題

1. 擴(kuò)增產(chǎn)量低或者無(wú)法擴(kuò)增？

原因分析：出現(xiàn)產(chǎn)物量低或者擴(kuò)增無(wú)條帶一般有以下原因：PCR 反應(yīng)中加入的裂解液過(guò)量；裂解液中混入了PCR抑制物；模板加入量不適合；PCR 循環(huán)數(shù)不夠；循環(huán)反應(yīng)退火溫度設(shè)置太高；PCR 引物錯(cuò)配嚴(yán)重。

解決方案：減少裂解液用量；或?qū)⒘呀猱a(chǎn)物稀釋10倍后再進(jìn)行PCR擴(kuò)增；或增大PCR反應(yīng)體系；裂解產(chǎn)物用量不應(yīng)超過(guò)PCR反應(yīng)總體積的1/10；增加PCR循環(huán)數(shù)以獲得更好的擴(kuò)增效果；降低退火溫度（每次降低3℃）；重新設(shè)計(jì)引物并在BLAST檢測(cè)引物的特異性。

2. 非特異性擴(kuò)增？

原因分析：PCR退火溫度太低；循環(huán)數(shù)太多；或引物濃度/模板濃度太高；未在冰上配制PCR反應(yīng)體系；或配制完成后放置時(shí)間太久；PCR引物錯(cuò)配。

解決方案：升高PCR退火溫度；減少PCR循環(huán)數(shù)；降低引物濃度或模板濃度；重新設(shè)計(jì)PCR引物。