一、H9C2大鼠心肌細胞轉染試劑產(chǎn)品說明：

1、產(chǎn)品名稱

Advanced DNA RNA Transfection Reagent

2、包裝規(guī)格

貨號：AD600025 、AD600050、AD600075、AD600150

規(guī)格：0.25ml、0.5ml、0.75ml、1.5ml

3、儲存條件

常溫運輸，4℃保存，可保存兩年，拒絕反復凍融。

二、H9C2大鼠心肌細胞轉染試劑轉染效果

轉染條件

培養(yǎng)板：24孔板

轉染試劑用量：2ul

轉染試劑：Advanced DNA RNA轉染試劑

轉染時間：24小時

血清：Z7180FBS-500超低內(nèi)毒素胎牛血清

細胞凍存：CE70100T無血清細胞凍存液

三、使用說明：

1、材料準備

RNA 濃度 20 uM /L

質(zhì)粒 DNA 濃度 300 ng-2 ug/ul（注意：①溶解于無菌雙蒸水或超純水；②無內(nèi)毒素 ）

2、操作步驟

提前 1 天接種細胞：細胞匯合度在 60-80%左右，再進行轉染。

核酸復合物制備：將核酸與轉染試劑按照 1:1 關系直接混合，用移液器吹吸 10-15 次混勻，室溫靜 止 10-15 分鐘。

在細胞培養(yǎng)基中加入核酸復合物：根據(jù)參考用量在細胞中加入核酸復合物，并輕輕混勻；細胞培養(yǎng)基 里面可以含有血清。

細胞換液：轉染 24 小時后對細胞進行正常換液，懸浮細胞轉染過程中不用換液。

分析結果：質(zhì)粒 DNA 轉染 48-72 小時后熒光檢測轉染效率，48-96 小時檢測 mRNA 或蛋白表達。若 進行穩(wěn)定表達細胞株的篩選，則在轉染后 24-48 小時左右加入適量的藥物進行篩選。siRNA 轉染后 9 小時熒光檢測轉染效率，48-72 小時檢測 mRNA 或蛋白表達。

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