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懸浮細(xì)胞的瞬時轉(zhuǎn)染操作2024/4/29
細(xì)胞轉(zhuǎn)染前的準(zhǔn)備：1.細(xì)胞：貼壁生長細(xì)胞：一般要求在轉(zhuǎn)染前一日，必須用胰酶處理成單細(xì)胞懸液，重新接種于培養(yǎng)皿或瓶，轉(zhuǎn)染當(dāng)日的細(xì)胞密度以70%-90%（貼壁細(xì)胞），最好在轉(zhuǎn)染前2-4h換一次新鮮培養(yǎng)液。...
WB蛋白樣本煮多久合適？2024/4/28
WB蛋白樣本煮制時間的那些事兒大家在進(jìn)行WB實驗時，可能會有這樣的疑問：蛋白樣本到底煮多久合適呢？??通常來說，WB蛋白樣本的煮制時間在3-5分鐘左右。不過，這只是一個大致的范圍哦，具體時間還得根據(jù)實...
兔源抗體2024/4/28
兔IgG只有一種亞型人和小鼠都有五種抗體類型（IgA,IgD，IgE，IgG,andIgM）。目前為止，已經(jīng)在兔中發(fā)現(xiàn)其中的四種（IgA,IgE,IgG，andIgM）。有趣的是，人有兩種IgA亞型，...
這種常見的維生素，有益于大腦，阻止認(rèn)知能力下降2024/4/26
癡呆癥，是一個具有高經(jīng)濟(jì)和社會負(fù)擔(dān)的全球健康問題。全球約有5000萬癡呆癥病例，每年新增約有1000萬例，在中國，有上千萬患者，在全球中位居第一名。盡管科學(xué)界投入了許多精力，但目前仍然沒有十分有效的治...
細(xì)胞計數(shù)的實驗步驟＆問題分析2024/4/25
細(xì)胞計數(shù)在細(xì)胞實驗中是非常常見的，大多數(shù)實驗室目前使用細(xì)胞計數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)，細(xì)胞計數(shù)板的結(jié)構(gòu)如下圖所示：實驗步驟1.所用細(xì)胞密度達(dá)到一定要求后進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)鋪板，提前準(zhǔn)備好細(xì)胞計數(shù)板、蓋玻片、計數(shù)器；...
DMEM、1640、MEM...這么多培養(yǎng)基有什么不同？2024/4/24
為什么細(xì)胞培養(yǎng)基有那么多不同的名字？常見的1640和DMEM有什么不同？培養(yǎng)基應(yīng)該如何儲存？這一期我們講講細(xì)胞培養(yǎng)所用到的培養(yǎng)基。01為什么細(xì)胞培養(yǎng)基有那么多不同的名字？培養(yǎng)基有很多不同的名字是因為根...
細(xì)胞共培養(yǎng)實驗步驟、技巧，Transwell or Millicell?2024/4/23
實驗?zāi)康模貉芯績煞N或三種細(xì)胞之間的相互作用實驗簡介：共培養(yǎng)是通過分別在插入式細(xì)胞培養(yǎng)小室內(nèi)外培養(yǎng)兩種或以上細(xì)胞，來研究細(xì)胞之間的相互作用，例如不同CD亞型的免疫細(xì)胞、免疫細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞、飼養(yǎng)層和干細(xì)胞...
原位雜交實驗流程2024/4/23
原位雜交組織（或細(xì)胞）化學(xué)簡稱原位雜交，屬于固相分子雜交的范疇，它是用標(biāo)記的DNA或RNA為探針，在原位檢測組織細(xì)胞內(nèi)特定核酸序列的方法。一、合成RNA探針1、設(shè)計探針引物RNA探針長度500bp最為...
Lipofectamine ™ RNAiMAX轉(zhuǎn)染2024/4/23
轉(zhuǎn)染是實驗過程中常用的技術(shù)操作，通俗來說，常見的轉(zhuǎn)染即為把某種功能性質(zhì)粒轉(zhuǎn)到細(xì)胞中去，通過轉(zhuǎn)染試劑的作用在經(jīng)過一段時間后，收集細(xì)胞通過WB、qpcr等來檢測質(zhì)粒是否正常發(fā)揮作用來達(dá)到我們實驗的某種需求...
如何提高DNA濃度/純度測定的準(zhǔn)確性？2024/4/23
分子生物學(xué)實驗中經(jīng)常需要對樣品進(jìn)行濃度和純度的測定，它相當(dāng)于一種質(zhì)控，以此來確保下游實驗的結(jié)果可靠。常用的DNA濃度/純度測定設(shè)備是紫外分光光度計，它的原理是利用物質(zhì)分子對紫外可見光譜區(qū)的輻射吸收來進(jìn)...
原代細(xì)胞培養(yǎng)入門2024/4/22
大家好！這篇文章是關(guān)于原代培養(yǎng)的入門知識，向剛?cè)腴T的同學(xué)科普這個實驗的基礎(chǔ)。包括以下內(nèi)容：原代培養(yǎng)的概念和流程分離組織的操作和注意事項解離組織獲取細(xì)胞的三種常見方法原代培養(yǎng)是指細(xì)胞分離之后至第一次傳代...
流式細(xì)胞術(shù)實驗常見問題分析2024/4/22
流式細(xì)胞技術(shù)（FlowCytometry,簡稱FCM）是一種高效的方法，用于分析和收集細(xì)胞懸液中的單個細(xì)胞。FCM的優(yōu)勢在于其速度快、結(jié)果客觀，并且具有重要的統(tǒng)計意義。它能夠處理復(fù)雜的樣本，同時收集多...
何時用瓶皿培養(yǎng)，何時用孔板培養(yǎng)2024/4/18
細(xì)胞的體外培養(yǎng)需要依附在人工附著物上，大多數(shù)脊椎動物細(xì)胞在人工附著物上會呈現(xiàn)為單層生長的狀態(tài)。所謂的人工附著物，就是常見的多孔板、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿。用什么類型的附著物來培養(yǎng)細(xì)胞，是有什么依據(jù)的呢？這一期...
ELISA實驗經(jīng)驗總結(jié)2024/4/18
前置知識ELISA（Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay，酶聯(lián)免疫吸附試驗）是一種常用的實驗技術(shù)，用于檢測和定量分析樣品中特定抗原或抗體的存在。ELISA是基于免疫學(xué)原理的一...
要做好CCK-8實驗，這三個重要環(huán)節(jié)請注意2024/4/17
在做細(xì)胞基礎(chǔ)實驗時，必要的一步就是需要探究清楚細(xì)胞的增殖變化和毒性耐藥變化情況，為下一步實驗做準(zhǔn)備。我們在做CCK-8增殖和毒性實驗中常常會遇到一下幾個問題：1.細(xì)胞鋪板問題2.給CCK-8的方式問題...
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