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更新時(shí)間:2025-02-11 16:06:18瀏覽次數(shù):30次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 化工儀器網(wǎng)產(chǎn)品名稱:Jurkat,Clone E6-1人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞、Jurkat,Clone E6-1人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞、Jurkat,Clone E6-1人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞、Jurkat,Clone E6-1人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞細(xì)胞介紹 這是Jurkat-FHCRC細(xì)胞株(Jurkat細(xì)胞株的衍生)的一個(gè)克隆。 Jurkat細(xì)胞株來源于一個(gè)14歲男孩的外周血。 經(jīng)佛波酯和外源凝集素或抗T3單克隆抗體(兩種類型的誘導(dǎo)都需要)誘導(dǎo)后可產(chǎn)生大量IL-2。 細(xì)胞特性 1) 來源:T淋巴細(xì)胞;急性T細(xì)胞白血病 2) 形態(tài):淋巴母細(xì)胞,懸浮生長 3) 含量:>1x106 個(gè)/mL 4) 污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性 5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝 運(yùn)輸和保存 可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式 (1)干冰運(yùn)輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇; (2)存活細(xì)胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。 (3)收到細(xì)胞后請(qǐng)拍照,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,請(qǐng)及時(shí)拍照與我們聯(lián)系。 細(xì)胞用途: 僅供科研使用。 細(xì)胞接收后的處理: 1) 收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。 2) 在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)時(shí),在低倍鏡(4或5X物鏡)下進(jìn)行,能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度。看細(xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?0X和20×物鏡下,同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照,(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為細(xì)胞需要售后時(shí)提供收到細(xì)胞時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。 3) 觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h。 4) 貼壁細(xì)胞:在運(yùn)輸過程中貼壁細(xì)胞會(huì)有脫落的現(xiàn)象,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落或者脫落后抱團(tuán)生長,可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中(或新的培養(yǎng)瓶中)。 5) 懸浮細(xì)胞:T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基)。 6) 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。 細(xì)胞培養(yǎng)步驟 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1) 準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%; GlutaMAX (Gibco,35050061),1%;雙抗,1%。 參考傳代周期:不超過300萬細(xì)胞/ mL,建議將活細(xì)胞密度控制在10萬-100萬/ mL之間 參考傳代密度:10萬活細(xì)胞/ mL,參考換液頻率:2-3天。 2) 注意 a)該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞,根據(jù)培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)以及客戶的反饋,傳代時(shí)使用【半換液法】對(duì)細(xì)胞狀態(tài)有利,因此我?guī)旖ㄗh您使用【半換液法】進(jìn)行傳代。同時(shí),您在收到細(xì)胞后,請(qǐng)不要通過離心的方式收集細(xì)胞,可以直接向培養(yǎng)瓶中添加等體積的新鮮培養(yǎng)液,然后將細(xì)胞吹打均勻后移入兩個(gè)新的T25培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)即可。 b)改細(xì)胞對(duì)血清質(zhì)量較為敏感,我?guī)旖ㄗh您使用進(jìn)口優(yōu)質(zhì)血清進(jìn)行培養(yǎng)。 c)該細(xì)胞對(duì)細(xì)胞密度較為敏感,培養(yǎng),傳代時(shí)請(qǐng)注意保持細(xì)胞密度在合適的范圍。 3) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 4) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。 二. 細(xì)胞處理: 1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)補(bǔ)加到6ml。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法: 1. 收到細(xì)胞后傳代推薦將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,建議凍存一支備用,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2到1:5的比例進(jìn)行。換液可通過添加幾毫升新鮮培養(yǎng)基或離心之后去上清液,添加新培養(yǎng)基重懸培養(yǎng)。 2) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。 下面T25瓶為類; 1,細(xì)胞凍存時(shí),取上清,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2,4min ,1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度1-2xE6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。 3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
南京萬木春生物科技有限公司(Najing Wanmuchun Biotechnology Co., Ltd)面向國內(nèi)外市場專業(yè)研發(fā)、生產(chǎn)和銷售細(xì)胞、 外泌體、ELISA 試劑盒、 抗體、重組蛋白及相關(guān)試劑。產(chǎn)品在免疫學(xué)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、代謝、 神經(jīng)科學(xué)等領(lǐng)域內(nèi)都有科學(xué)文獻(xiàn)發(fā)表,被國內(nèi)外多所大學(xué)、研究機(jī)構(gòu)和藥學(xué)平臺(tái)使用并發(fā)表文獻(xiàn)多達(dá)1000多次。我公司憑借優(yōu)異的產(chǎn)品和完善的服務(wù) 體系現(xiàn)已受到廣大國內(nèi)外用戶的青睞和認(rèn)可。
品牌優(yōu)勢(shì)
1、產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):產(chǎn)品具有高特異性、回收率高、線性好、變異系數(shù)低、穩(wěn)定性好;
2、質(zhì)量保證:產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,每批次產(chǎn)品必須通過 QA、QC 檢測才可出庫;
3、實(shí)力強(qiáng)大: 標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室、研發(fā)中心,動(dòng)物房 ;
4、技術(shù)支持:技術(shù)部 5*8 小時(shí)技術(shù)問題及時(shí)解答;
5、服務(wù)周到:發(fā)貨及時(shí),三個(gè)工作日順豐快遞;售后無憂,包退包換。
6、研發(fā)、生產(chǎn)科研產(chǎn)品:ELISA 試劑盒:人、大小鼠、牛、兔、山羊、倉鼠、豬、馬、雞、犬、豚鼠、猴、綿羊等多種屬1000多種指標(biāo);
抗體:兔多抗、鼠單抗種類豐富,一抗 1 萬余種,二抗 100 多種;
重組蛋白:多項(xiàng)發(fā)明,原核表達(dá)系統(tǒng)穩(wěn)定表達(dá)蛋白 1000 余種。
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