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BEL7402/Adr人肝癌阿

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更新時間:2025-02-11 14:36:32瀏覽次數(shù):31次

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細(xì)胞系特征細(xì)胞株名稱:BEL/Adr人肝癌耐藥株種屬:人組織來源:肝癌生長特性:貼壁生長形態(tài)特征:上皮細(xì)胞微生物及支原體檢測:陰性安全性:所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄

細(xì)胞系特征

                    

細(xì)胞株名稱:BEL/Adr人肝癌耐藥株

種屬:人

組織來源:肝癌

生長特性:貼壁生長

形態(tài)特征:上皮細(xì)胞

微生物及支原體檢測:陰性

安全性:所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。

培養(yǎng)條件:

 

 

 

培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10%胎牛血清+500ng/mlAdr

血清我們推薦用:

GIBCOFBS-10099-141HYCLONEFBS-SH30084.03

培養(yǎng)條件:37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

傳代方法:

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

收到細(xì)胞后,在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個細(xì)胞生長情況。

(一)如果細(xì)胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。

()如果細(xì)胞已長滿,即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:

1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。

2. 0.7-1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,用力拍打瓶壁,期間每隔 5-10s放到顯微鏡下觀察,直至50-70%的細(xì)胞脫落后,加入2ml 以上培養(yǎng)基中止消化。

3. 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒有特別說明,收到細(xì)胞后的次傳代一般是一傳二。

注:1、觀察細(xì)胞在低倍鏡(45X物鏡)下進行,否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度。看細(xì)胞的形態(tài)請在10X20X物鏡下。

2、瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基,細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。

3、有些細(xì)胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。

4、收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請及時與我們聯(lián)系。..

 

凍存方法:

  凍存液:90%胎牛血清,10%DMSO

  儲存:液氮儲存

 

 

                                                                                                                                                                            Page 3

upregulation of the expression of IL-2 receptor

In addi  autolysosomes, where cargo will be degraded and recycled back into the cytosol [62–64].

Although in the past autophagy was described as a non-selective, in-bulk degradation

process, evidence in recent years demonstrates that autophagy can selectively sequester and degrade specific organelles (e.g. mitophagy, ERphagy…), pathogens (xenophagy), lipid droplets (lipophagy), ribosomes (ribophagy),protein aggregates (aggregaphagy),

macromolecules, and even specific proteins [reviewed in [65]]. This specificity can be

achieved through adaptor proteins that recognize the cargo and interact with LC3 through

specific motifs (WXXI/L)—termed “LC3-interacting regions" (LIR)) [66]. Autophagic

cargo receptors include, among others, p62/sequestosome-1 (SQSTM1),neicdfor of

BRCA1 gene 1 (NBR1), nuclear dot protein 52 kDa (NDP52), Tax1-binding protein 1(TAX1BP1), and optineurin (OPTN). Importantly, these adaptors contain a ubiquitin-binding

domain, which can recognize ubiquitinated substrates, LIRs, and dimerization/ multimerization domains [66].


 

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