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HT115(DE3)大腸桿菌感受態細胞

產品信息：

組成 BC216-01

HT115(DE3) Competent cells 20×100µl

pUC19(0.1ng/µl） 5µl

儲存條件：-70℃保存，避免反復凍融。

產品說明：

HT115(DE3)是 RNase III 缺陷型大腸桿菌菌株，可以用 IPTG 誘導方法表達生產 dsRNA。用于 RNAi 干擾試驗。該菌株又具備λ噬菌體

DE3 區，可以表達 T7 RNA 聚合酶，適用于含有 T7 啟動子的原核表達載體（如 pET 等）的高效表達。非 T7 啟動子的表達載體（如 pGEX，

pMal，pTrc 等載體）也可以在該菌株中表達。HT115(DE3)感受態細胞由特殊工藝制成，pUC19 質粒檢測轉化效率達 1×10 6 cfu/μg DNA。

基因型：F- mcrA mcrB, IN(rrnD-rrnE)1 rnc14::Tn10λ(DE3 lavUV5::T7 polymerase)

菌株抗性：對氨芐、、、和敏感。具有四環素抗性。

質粒轉化步驟：

1. 將感受態細胞置于冰水浴中化凍。待細胞剛化凍后，加入目的質粒到細胞中，用手指管底，輕輕混勻；

2. 冰水浴中放置 30 分鐘，不要晃動；

3. 42℃熱擊 60 秒鐘，不要晃動；

4. 冰水浴中放置 2 分鐘，不要晃動；

5. 加入 500μl 無菌的 SOC 或 LB 培養基；

6. 置于 37℃搖床中，150-200rpm 震蕩復蘇培養 60 分鐘；

7. 取 50-100μl 菌液涂布在含有抗性的 LB 平板上。待液體吸干后，倒置平板，37℃培養 12-16 小時。

（平板劃線分離法：復蘇培養結束后，12000rpm 離心 30 秒鐘，棄掉上清，留 100μl 左右的液體，用 200μl 吸頭輕輕吹打散菌塊，取 10μl

重懸的菌液分多點滴在平板上，傾斜吸頭，用吸頭頭部的側面將滴在平板上的液體來回劃線。這個方法可以獲得更多更大的單克隆菌落。）

（質?？焖俎D化步驟：對于氨芐抗性的質粒，將步驟 2 的時間縮短到 5 分鐘，步驟 4 完成后，可直接涂布或劃線于含氨芐

抗性的 LB 平板上。其它抗性的質粒仍需 60 分鐘的復蘇培養。）

蛋白表達步驟：

1. 挑取單菌落，接種到含 5ml 帶抗生素的 LB 培養基中；

2. 37℃，200rpm 震蕩培養細菌至對數生長期（OD600=0.4-0.8）；

3. 加入 IPTG 到終濃度為 0.4mM，37℃誘導 2-4 小時或 16℃誘導過夜；

4. 誘導完成后，離心收集菌體，用合適的方法（如考馬斯亮藍染膠法，Western-Blot 法或酶活性分析法）分析菌體裂解物的總蛋白、上

清和沉淀組分，明確表達產物的表達狀況（可溶性或不溶性表達）；

5. 大量表達時，可用 10ml 過夜培養物轉接到 1L 培養基中，當培養到 OD600=0.4-0.8 時，加入終濃度為 0.4mM 的 IPTG，37℃誘導 2-4

小時或 16℃誘導過夜。（不同蛋白表達的條件有所不同，需在實驗中優化。）

E 、感受態細胞
E-1 、大腸桿菌克隆感受態細胞
貨號	產品名稱	規格	單位
BC101-01	0 感受態細胞	100μl ×10	包
BC101-02	0 感受態細胞	100μl ×20	包
BC102-01	DH5α 感受態細胞	100μl ×10	包
BC102-02	DH5α 感受態細胞	100μl ×20	包
BC103-01	JM109 感受態細胞	100μl ×10	包
BC103-02	JM109 感受態細胞	100μl ×20	包
BC104-01	XL1-Blue 感受態細胞	100μl ×10	包
BC104-02	XL1-Blue 感受態細胞	100μl ×20	包
BC105-01	Mach 1-T1 感受態細胞	100μl ×10	包
BC105-02	Mach 1-T1 感受態細胞	100μl ×20	包
BC117-01	Turbo 感受態細胞	100ul ×10	包
BC117-02	Turbo 感受態細胞	100ul ×20	包
BC118-01	Stable 感受態細胞	100ul ×20	包
BC106-01	DH10B 感受態細胞	100μl ×10	包
BC106-02	DH10B 感受態細胞	100μl ×20	包
BC107-01	OmniMAX2-T1 感受態細胞	100μl ×10	包
BC107-02	OmniMAX2-T1 感受態細胞	100μl ×20	包
BC108-01	Stbl3 感受態細胞	100μl ×20	包
BC115-01	Stbl4 感受態細胞	100μl ×20	包
BC109-01	XL10-Gold 感受態細胞	100μl ×20	包
BC110-01	JM110 感受態細胞	100μl ×20	包
BC111-01	DB3. 1 感受態細胞	100μl ×20	包
BC112-01	DH10BAC 感受態細胞	100μl ×20	包
BC113-01	NEB 10-beta 感受態細胞	100μl ×20	包
BC114-01	BJ5183-AD- 1 感受態細胞	100μl ×20	包
E-2 、大腸桿菌表達感受態細胞
貨號	產品名稱	規格	單位
BC201-01	BL21(DE3) 感受態細胞	100μl ×10	包
BC201-02	BL21(DE3) 感受態細胞	100μl ×20	包
BC202-01	BL21(DE3) pLysS 感受態細胞	100μl ×10	包
BC202-02	BL21(DE3) pLysS 感受態細胞	100μl ×20	包
BC203-01	M15 感受態細胞	100μl ×10	包
BC203-02	M15 感受態細胞	100μl ×20	包
BC204-01	Rosetta(DE3) 感受態細胞	100μl ×10	包
BC204-02	Rosetta(DE3) 感受態細胞	100μl ×20	包
BC205-01	OrigamiB(DE3) 感受態細胞	100μl ×10	包
BC205-02	OrigamiB(DE3) 感受態細胞	100ul ×20	包
BC206-01	T7 表達感受態細胞	100μl ×10	包
BC206-02	T7 表達感受態細胞	100μl ×20	包
BC207-01	T7pLysY 感受態細胞	100μl ×10	包
BC207-02	T7pLysY 感受態細胞	100μl ×20	包
BC208-01	Shuffle T7-K12 感受態細胞	100μl ×10	包
BC208-02	Shuffle T7-K12 感受態細胞	100μl ×20	包
BC209-01	Shuffle T7-B 感受態細胞	100μl ×10	包
BC209-02	Shuffle T7-B 感受態細胞	100μl ×20	包
E-3 大腸桿菌電轉感受態細胞
貨號	產品名稱	規格	單位
BC401-01	NEB 10-beta 電轉感受態細胞	50μl ×20	包
BC402-01	BJ5183 電轉感受態細胞	50μl ×20	包
BC403-01	BJ5183-AD- 1 電轉感受態細胞	50μl ×20	包
BC404-01	0 電轉感受態細胞	50μl ×20	包
BC405-01	DH5α 電轉感受態細胞	50μl ×20	包
E-4 農桿菌感受態細胞
貨號	產品名稱	規格	單位
BC301-01	LBA4404 農桿菌感受態細胞	100ul ×20	包
BC302-01	AGL1 農桿菌感受態細胞	100ul ×20	包
BC303-01	EHA105 農桿菌感受態細胞	100ul ×20	包
BC304-01	GV3101 農桿菌感受態細胞	100ul ×20	包
E-5 、農桿菌電轉感受態細胞
貨號	產品名稱	規格	單位
BC305-01	LBA4404 農桿菌電轉感受態細胞	50μl ×20	包
BC306-01	AGL1 農桿菌電轉感受電轉態細胞	50μl ×20	包
BC307-01	EHA105 農桿菌電轉感受態細胞	50μl ×20	包
BC308-01	GV3101 農桿菌電轉感受態細胞	50μl ×20	包

南京萬木春生物科技有限公司（Najing Wanmuchun Biotechnology Co., Ltd)面向國內外市場專業研發、生產和銷售細胞、外泌體、ELISA 試劑盒、抗體、重組蛋白及相關試劑。產品在免疫學、信號轉導、代謝、神經科學等領域內都有科學文獻發表，被國內外多所大學、研究機構和藥學平臺使用并發表文獻多達1000多次。我公司憑借優異的產品和完善的服務體系現已受到廣大國內外用戶的青睞和認可。
品牌優勢
1、產品優勢：產品具有高特異性、回收率高、線性好、變異系數低、穩定性好；
2、質量保證：產品質量穩定，每批次產品必須通過 QA、QC 檢測才可出庫；
3、實力強大： 標準實驗室、研發中心，動物房；
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6、研發、生產科研產品：ELISA 試劑盒：人、大小鼠、牛、兔、山羊、倉鼠、豬、馬、雞、犬、豚鼠、猴、綿羊等多種屬1000多種指標；
抗體：兔多抗、鼠單抗種類豐富，一抗 1 萬余種，二抗 100 多種；
重組蛋白：多項發明，原核表達系統穩定表達蛋白 1000 余種。