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SNP-M170-小鼠冠狀動脈平滑肌細胞
  • SNP-M170-小鼠冠狀動脈平滑肌細胞
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貨物所在地:湖北武漢市

地: 武漢東湖高新區高新大道光谷生物

更新時間:2025-02-15 21:00:08

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尚恩生物依托國際化的*技術及多年專業化的原代細胞分離培養經驗,能夠為您提供高品質的原代細胞、原代細胞提取物定制服務。集結豐富經驗的人才,并配備了整套實驗設備,全程自主研發,嚴控開發流程,保障產品質量,緊抓售后服務,可以提供高質量的小鼠冠狀動脈平滑肌細胞。已與國內外多家科研單位、藥企、以及醫院等建立了良好的合作關系,成為生物醫藥行業的誠信伙伴和堅強后盾。

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一、細胞基本屬性

貨號:SNP-M170

產品名稱:小鼠冠狀動脈平滑肌細胞

物種:小鼠

組織來源:冠狀動脈

細胞簡介:該細胞分離自冠狀動脈組織;冠狀動脈是供給心臟血液的動脈,起于主動脈根部,分左右兩支,行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則,將冠狀動脈的分布分為三型:右優勢型、均衡型、左優勢型。左右冠狀動脈是升主動脈的第一對分支。左冠狀動脈為一短干,發自左主動脈竇,經肺動脈起始部和左心耳之間,沿冠狀溝向左前方行后,立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行,旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動脈的后室間支相吻合。它是構成冠狀動脈壁的主要細胞成分,細胞膜上分布著多種離子通道,如電壓依賴性Na+通道、多種Ca2+通道和K+通道;它們參與了靜息電位的維持與細胞膜電位的復極化、超極化,調節血管平滑肌的收縮及舒張功能,此外動脈粥樣硬化的發展也涉及冠狀動脈平滑肌細胞增殖、炎癥及凋亡等。因此,原代分離培養的冠狀動脈平滑肌細胞,對研究生理和病理狀態下離子通道及血管張力變化機制具有非常重要的作用。冠狀動脈平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。

方法簡介:采用胰蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10^5cells/瓶。

配套體系:平滑肌體系

發貨形式:T25瓶(1×106左右)

規格:5×10^5cells/T25瓶

培養條件:具體培養條件詳詢尚恩生物細胞培養技術專員

培養環境:37℃,5%二氧化碳

我們推薦使用尚恩生物小鼠冠狀動脈平滑肌細胞專用*培養基(產品貨號:SNPM-M170)作為體外培養的培養基。


二、細胞培養操作

換液周期2-3天
培養基體積T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例1:2-1:4(具體情況視細胞生長速度及密度決定)
傳代方法1.盡量吸干凈T25瓶原培養基;
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s,吸走潤洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,輕輕晃動培養瓶以使胰酶鋪勻瓶底細胞層;
4.將培養瓶放入37度培養箱消化;
5.消化到細胞間隙變大,但未*脫落時加2-3ml*培養基終止胰酶消化;
6.混勻細胞,900rpm離心3-5min,棄上清;
7.加新的*培養基輕輕重懸細胞,均勻分到新的培養瓶里;
8.補足*培養基,將培養瓶放回培養箱靜置培養;
注意事項不同品牌胰酶消化時間差別較大,注意嚴格控制消化時間

消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔,不要產生過多氣泡以免影響細胞狀態。


三、細胞凍存操作
凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規格200-300萬/ml,1ml每管
凍存方法1.消化并離心獲得細胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細胞;
2.將細胞懸液盡快移入已經做好標記的凍存管;
3.將凍存管轉入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉入液氮保存;沒有程序凍存盒的實驗室,加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉入-80度過夜,第二天轉入液氮保存

注意事項凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調整實驗方案


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