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一、細胞基本屬性
細胞名稱：A20（小鼠B細胞淋巴瘤細胞）
細胞別稱：A20
細胞貨號：SNL-153
細胞種屬：小鼠
生長情況：半貼壁
培養條件：1640+10%FBS+1%雙抗
培養環境：air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、細胞培養操作
換液周期：2-3天
培養基體積：T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml
傳代比例：1:2-1:4（具體情況視細胞生長速度及密度決定）
傳代方法：
1.輕輕吸走培養上清，留2-3ml培養基輕輕吹打細胞面吹下細胞；
2.混勻細胞，收集細胞培養基，900rpm離心3-5min，棄上清；
3.加新的*培養基輕輕重懸細胞，均勻分到新的培養瓶里；
補足*培養基，將培養瓶放回培養箱靜置培養；
注意事項：半貼壁細胞會附著瓶底，但貼壁不緊，輕輕吸取培養基輕輕吹打細胞面就會脫落，不需要胰酶消化。建議使用培養皿培養，更適合吹打細胞操作，吹打細胞注意盡量輕柔，不要產生過多氣泡以免影響細胞狀態。
三、細胞凍存操作
凍存液配方：92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規格：200-300萬/ml，1ml每管
凍存方法：
1.離心獲得細胞沉淀后，加配置好的凍存液輕輕重懸細胞；
2.將細胞懸液盡快移入已經做好標記的凍存管；
將凍存管轉入程序凍存盒，放入-80度冰箱過夜，第二天轉入液氮保存；沒有程序凍存盒的實驗室，加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min，再-20度靜置2h后轉入-80度過夜，第二天轉入液氮保存
注意事項：凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性，若有異常，及時調整實驗方案
Tips：
1.細胞半貼壁圓形生長，部分懸浮圓形，傳代時均可收集培養，換液時將懸浮細胞離心收集后重新接回原瓶，若貼壁細胞較多活性較好時可以不要懸浮的細胞；
2.傳代有部分細胞碎片可以換液后用PBS潤洗細胞清除，使用的PBS需要恢復到室溫，加入時不要沖到細胞面，潤洗盡量輕柔；
3.該細胞生長較快，培養基消耗較快，培養時注意密切關注細胞狀態，密度較高、培養基有變黃趨勢時及時換液避免細胞狀態變差；
我們推薦使用尚恩生物A20（小鼠B細胞淋巴瘤細胞）*培養基（產品貨號：SNLM-153）作為體外培養的培養基。
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