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細胞“罷工”?!細胞傳代后增殖緩慢之謎!

閱讀:635      發布時間:2024-11-25
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培養箱里,我們的“小勞模"細胞們每天忙著分裂增殖,為我們的實驗貢獻著力量。然而,有時候,這些小家伙們卻會突然“罷工",傳代后的增殖速度變得慢如蝸牛,仿佛一夜之間愛上了慢生活。這背后究竟是什么原因呢怎樣才能讓細胞們恢復干勁呢? 請看下文:

接種密度低

你知道嗎?很多細胞都有密度依賴細胞自身會分泌一些因子到培養基中促進周圍的細胞生長(旁分泌)。細胞密度太低,這種化學信號的傳遞減弱,細胞狀態受到影響接種密度越低,增殖越慢,甚至不增殖。

細胞“罷工

解決方案:根據細胞生長速度確定合適的傳代比例和接種密度。如果細胞已經傳稀了,可以耐心繼續培養,或將細胞重新傳到更小的器皿中,增加密度。特別提醒!T25培養瓶底面積為25cm2,10cm培養皿底面積是55cm2,所以一個T25傳10cm皿約等于1:4傳代,而不是1:2


培養基、血清不合適

想象一下,你突然到一個全新的城市上學上班,面對全新的環境,是不是也需要適應一段時間呢?細胞突然被換到新的培養基和血清中,也會出現水土不服的情況,特別是對血清要求高的細胞新的培養基或血清不對細胞胃口時,導致它們食欲不振",生長速度自然就慢了下來。

細胞“罷工

解決方案

檢查新培養基和原培養基的配方是否有差異,是否需要額外添加試劑,成分盡量保持一致。新培養基和原培養基混合培養1-2代,讓細胞慢慢適應,如果細胞正常生長,再完quan替換為新的培養基。如果它們實在適應不了新培養基還是換回原培養基,畢竟實驗不等人啊!另外,記得定期換液別等培養基都變成金黃色了才換,這無異于把細胞活活餓死!



細胞受損

在細胞傳代的過程中,如果發生一些“工傷"事故比如胰酶消化時間過長,導致它們受傷;消化時間過短,細胞們還沒完quan分開,就被強行“搬家"了,導致細胞膜受損;重懸時瘋kuang吹打,生怕吹不均勻,結果把細胞打得半死不活,都會導致細胞增殖速度變慢。

細胞“罷工

解決方案:

傳代時嚴格控制胰酶消化時間,控制吹打次數和力道。如果細胞已經受損了,傳代后漂浮細胞和碎片很多,可以嘗試提高血清濃度(總量不超過20%)幫助它們恢復元氣。如果傷情嚴重,搶救失敗,那還是重新復蘇吧!

細胞衰老

原代細胞以及一些有限傳代的細胞系,隨著傳代次數增多,細胞生長速度逐漸減慢,最終停止增殖。

細胞“罷工


解決方案:

細胞衰老是自然法則無法避免,我們可以通過優化培養條件和操作,讓細胞盡可能保持好的狀態,并及時進行實驗對于有限細胞系,要記得凍存早期代次作為備份。對于原代細胞,則要規范提取步驟,保證細胞質量穩定,實驗重復性才能更好。

雖然細胞不增殖的時候我們心急如焚,但也讓我們更加深入了解自己細胞的特性。通過不斷探索和實踐,我們找到了z適合的培養方案,細胞們會更加健康、快樂地生長著。祝各位同學和自己的細胞們相處愉快!



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