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MG1655感受態(tài)

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  • 型號 CC96147
  • 品牌 其他品牌
  • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
  • 所在地 上海市

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更新時間:2024-11-04 15:27:57瀏覽次數(shù):28

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨    
MG1655 菌株來源于 W1485,是 K12 的衍生菌株,是一種經(jīng)過較少改造、比較接近于“野生型"的大
腸桿菌工程菌株。MG1655 外觀形態(tài)標(biāo)準(zhǔn),既可做為擴(kuò)增大腸桿菌野生型基因的模板使用,也可作
為蛋白表達(dá)的宿主菌株使用;但該菌株不含核酸酶 endA1 突變,因此體內(nèi)核酸酶含量較高:提取質(zhì)
粒時務(wù)必使用質(zhì)粒提取試劑盒中的去蛋白液處理,以盡量去除核酸酶,否則提取的質(zhì)粒很容易被
降解。經(jīng) pUC

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品簡介
MG1655 菌株來源于 W1485,是 K12 的衍生菌株,是一種經(jīng)過較少改造、比較接近于野生型"的大
腸桿菌工程菌株。MG1655 外觀形態(tài)標(biāo)準(zhǔn),既可做為擴(kuò)增大腸桿菌野生型基因的模板使用,也可作
為蛋白表達(dá)的宿主菌株使用;但該菌株不含核酸酶 endA1 突變,因此體內(nèi)核酸酶含量較高:提取質(zhì)
粒時務(wù)必使用質(zhì)粒提取試劑盒中的去蛋白液處理,以盡量去除核酸酶,否則提取的質(zhì)粒很容易被
降解。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測,MG1655 感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 10cfu/μg DNA
產(chǎn)品組成
組分
MG1655
化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:K12 FλilvGrfb-50 rph-1
存儲條件
-80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥10cfu/μg pUC18 DNA
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預(yù)熱),后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保優(yōu)良轉(zhuǎn)化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。


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