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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品簡介
XL2-Blue菌株來源于XL1-Blue菌株，為Hte (high transformation efficiency)基因型。Hte是Stratagene
開發(fā)的特異性提高感受態(tài)轉(zhuǎn)化效率及大質(zhì)粒轉(zhuǎn)化能力的宿主菌基因型，該基因型使得 XL2-Blue 適
用于大質(zhì)粒 DNA 和重組產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化，降低片段大小的偏愛性，多用于文庫構(gòu)建，并已成功應(yīng)用于
40 kb 質(zhì)粒的構(gòu)建。recA1 和 endA1 的突變有利于插入 DNA 的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒 DNA 的提取。
hsdSMR 突變導(dǎo)致 EcoK 核酸內(nèi)切酶系統(tǒng)缺失，增強(qiáng)了外源 DNA 的穩(wěn)定性和提取質(zhì)量。由于攜帶
lacZΔM15 突變，該菌株可用于藍(lán)、白斑篩選。此外，該菌株還攜帶四環(huán)s和氯m素抗性。XL2-
Blue 感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，pUC18 質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率 108 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
XL2-Blue 感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：TetR Δ(mcrA)183 Hte [F? {proAB lacIq lacZΔM15 Tn10 (TetR) Amy CamR}] Δ(mcrCB-hsdSMR
mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1
存儲(chǔ)條件
-80 ℃保存；請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留；
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動(dòng)，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預(yù)熱），然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min；
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用；
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10；
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保優(yōu)良轉(zhuǎn)化效率，整個(gè)操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔
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