詳細介紹
產品簡介
發根農桿菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)農桿菌屬(agrobacterium)的一種革蘭氏陰性土壤細菌,它能夠
感染大多數雙子葉植物和少數單子葉植物以及個別裸子植物。 MSU440 發根農桿菌菌株含有農桿
堿型 Ri 質粒,具有廣泛的宿主范圍(玉米,煙草,茶樹,青蒿等),同時具有鏈m素抗性。本公
司生產的 MSU440 化學轉化感受態細胞經特殊工藝制作,pCAMBIA2301 質粒(卡那m素抗性)檢
測,轉化效率≥104 cfu/μg DNA。
產品組成
組分
MSU440
化學感受態細胞
10 ×100 μL
100 ×100μL
定制
基因型:Agrobacterium rhizogenes (StrR ) MSU440 Ri (agropine type)
存儲條件
-80 ℃保存; 請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
除農桿堿型 Ri 質粒外,無外源質粒 DNA 殘留
化學法轉化效率 ≥ 104 cfu/μg。
使用方法
1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出,在手心融化成冰水混合物,置于冰水浴中;
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態細胞中,用手撥管底混勻,依次于冰上靜置 10 分鐘、液氮 5 分
鐘(或干冰乙醇浴和-80℃冰凍)、37 ℃水浴 5 分鐘、冰浴 5 分鐘;
3.加入 900 μl 無抗生素的 YEB 液體培養基,于 28℃振蕩培養 2~3 小時;
4. 6000 rpm 離心一分鐘收菌,留取 100 μl 左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應抗生素的 YEB 平板
上,倒置放于 28 ℃培養箱培養 2-3 天。
注意事項
1. 感受態細胞冰浴中解凍后應立即使用;
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態細胞體積的 1/10;
3. MSU440 具有鏈m素抗性,不可用于具有鏈m素抗性質粒的轉化。