化工儀器網
詳細介紹
Rosetta 2 化轉表達感受態(tài)
產品簡介
Rosetta 2 來源于 Rosetta，本菌株含有 pRARE2 質粒，除了能夠提供原 Rosetta(DE3)宿主菌含有 的
AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和 GGA 六個稀有密碼子的 tRNA 外，還提供了第七個稀有密碼子
CGG 的 tRNA。Rosetta2 載體通過提供稀有密碼子，使得該宿主菌相對于其他大腸桿菌，能夠提供
更加“通用”的蛋白質表達，從而提升目的蛋白表達水平。同時，pRARE2 質粒具有氯霉素抗性。經
PUC18 質粒檢測，感受態(tài)細胞的效率可達 108 cfu/μg DNA。
產品組成
組分
CC96143-01
CC96143-02
CC96143-03
Rosetta 2 感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：F- ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm pRARE2 (CamR)
Rosetta 2 化轉表達感受態(tài)
存儲條件
-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
除 pRARE2 外，無外源質粒 DNA 殘留；
化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預熱），然后置于 37 ℃搖床復壯 45 min；
5. 取不同體積的轉化產物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
Rosetta 2 化轉表達感受態(tài)
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰水浴中解凍后應立即使用；
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10；
3. 加入待轉化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保.高轉化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。
產品簡介
Rosetta 2 來源于 Rosetta，本菌株含有 pRARE2 質粒，除了能夠提供原 Rosetta(DE3)宿主菌含有 的
AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和 GGA 六個稀有密碼子的 tRNA 外，還提供了第七個稀有密碼子
CGG 的 tRNA。Rosetta2 載體通過提供稀有密碼子，使得該宿主菌相對于其他大腸桿菌，能夠提供
更加“通用”的蛋白質表達，從而提升目的蛋白表達水平。同時，pRARE2 質粒具有氯霉素抗性。經
PUC18 質粒檢測，感受態(tài)細胞的效率可達 108 cfu/μg DNA。
產品組成
組分
CC96143-01
CC96143-02
CC96143-03
Rosetta 2 感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：F- ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm pRARE2 (CamR)
存儲條件
-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
除 pRARE2 外，無外源質粒 DNA 殘留；
化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預熱），然后置于 37 ℃搖床復壯 45 min；
5. 取不同體積的轉化產物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰水浴中解凍后應立即使用；
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10；
3. 加入待轉化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保.高轉化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。
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