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JM330 化轉克隆感受態

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更新時間:2023-04-26 17:18:27瀏覽次數:444

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產品簡介

供貨周期 現貨 應用領域 生物產業
JM330 化轉克隆感受態 菌株是 E. coli K-12 菌株和 E. coli B 菌株的雜合產物(同時也是 Stbl3 的原始菌株)。該菌株
攜帶 recA13 突變,可有效抑制長片段末端重復區的重組,降低錯誤重組的概率;但由于其不含核
酸酶 endA1 突變,體內核酸酶含量較高,提取質粒時務必使用質粒提取試劑盒中的去蛋白液以去除
核酸酶。

詳細介紹

產品簡介

JM330 化轉克隆感受態

HB101 菌株是 E. coli K-12 菌株和 E. coli B 菌株的雜合產物(同時也是 Stbl3 的原始菌株)。該菌株

攜帶 recA13 突變,可有效抑制長片段末端重復區的重組,降低錯誤重組的概率;但由于其不含核

酸酶 endA1 突變,體內核酸酶含量較高,提取質粒時務必使用質粒提取試劑盒中的去蛋白液以去除

核酸酶。hsdS20 背景使 HB101 缺失內切酶系統,增強了外源 DNA 的穩定性和提取質量;此菌株具

有鏈霉素抗性;不存在 lacIqZΔM15,不可用于藍、白斑篩選。經 pUC18 質粒轉化檢測,HB101

受態細胞的轉化效率可達 107 cfu/μg DNA

產品組成

JM330 化轉克隆感受態

組分 CC96174-01 CC96174-02 CC96174-03

HB101

化學感受態細胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型:F- mcrB mrr hsdS20 (rB- mB- ) recA13 leuB6 ara-14 proA2 lacY1 galK2 xyl-5 mtl-1 rpsL20 (StrR) glnV44 λ-

存儲條件

-80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

JM330 化轉克隆感受態

質量控制

無外源質粒 DNA 殘留;

化學法轉化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA

使用方法

1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;

2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min

3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min

4. 向離心管中加入 900 μL LB SOC 培養基(室溫或 37 ℃預熱),后置于 37 ℃搖床復壯 45 min

5. 取不同體積的轉化產物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養箱培養過夜。

注意事項

1. 感受態細胞冰浴中解凍后應立即使用;

2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態細胞體積的 1/10

3. 加入待轉化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態細胞,僅用手指輕彈即可;

4. 為確保.高轉化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。

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