DH12S 化轉(zhuǎn)克隆感受態(tài)產(chǎn)品簡介
大腸桿菌 DH12S 來源于 DH10B，可用于生產(chǎn)特別純的單鏈 DNA；同時，M13KO7 輔助噬菌體可
用來生成單鏈 DNA。由于該菌株是 endA+基因型，其所生產(chǎn)的單鏈 DNA中很少污染雙鏈 DNA。在
F´中表達的 LacI 蛋白可以調(diào)控 lac 啟動子的表達。

產(chǎn)品簡介

DH12S 化轉(zhuǎn)克隆感受態(tài)

大腸桿菌 DH12S 來源于 DH10B，可用于生產(chǎn)特別純的單鏈 DNA；同時，M13KO7 輔助噬菌體可

用來生成單鏈 DNA。由于該菌株是 endA+基因型，其所生產(chǎn)的單鏈 DNA中很少污染雙鏈 DNA。在

F´中表達的 LacI 蛋白可以調(diào)控 lac 啟動子的表達。此外，由于消除了 mcrA，mcrBC，mrr，hsdRMS

等限制系統(tǒng)，該菌株可以高效地克隆大部分基因組序列。DH12S 帶有 lacZΔM15 突變，可以進行藍

白斑篩選實驗。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測，DH12S 感受態(tài)細胞的轉(zhuǎn)化效率可達 108 cfu/μg DNA。

DH12S 化轉(zhuǎn)克隆感受態(tài)

產(chǎn)品組成

組分 CC96128-01 CC96128-02 CC96128-03

DH12S

化學感受態(tài)細胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型：mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80 ΔlacZΔM15 ΔlacX74 recA1 deoR Δ(ara, leu)7697 araD139 galU galK rpsL

F' [proAB+ lacIqZΔM15]

DH12S 化轉(zhuǎn)克隆感受態(tài)

存儲條件

-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

質(zhì)量控制

無外源質(zhì)粒 DNA 殘留；

化學法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法

1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；

2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；

3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90s 后，立刻置于冰浴中靜置 2-3 min；

4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預(yù)熱），后置于 37 ℃搖床復壯 45 min；

5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。

注意事項

1. 感受態(tài)細胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用；

2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細胞體積的 1/10；

3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞，僅用手指輕彈即可；

4. 為確保.高轉(zhuǎn)化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。