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詳細介紹
DH10B plus 化轉克隆感受態
產品簡介
本品為使用大腸桿菌 DH10B 菌株制備的高效化學感受態細胞，轉化效率可達 108 cfu/μg DNA，被廣
泛用于質粒轉化、基因克隆等；可以使用藍白斑篩選。
產品組成
組分
CC96101-01
CC96101-02
CC96101-03
DH10B 感受態細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：F- mcrA ?(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZ?M15 ?lacX74 recA1 endA1 araD139 ?(ara, leu)7697
galE15 galK λ- rpsL nupG
DH10B plus 化轉克隆感受態
存儲條件
-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
產品特性
-來源于 MC1061 菌株，可用于基因克隆等；
-rpsL 突變賦予 DH10B 菌株鏈霉素抗性；
-藍白斑篩選時，需在平板上預先涂布 IPTG 和 X-gal；
-mcrA、mcrBC 及 mrr 突變使 DH10B 菌株適合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的 DNA ；
-由于 recA1 和 endA1 的突變，因此該菌株的重組率較低，有利于插入 DNA 的穩定，故常用于克隆
質粒的保存和高純度質粒 DNA 的提取。
質量控制
無外源質粒 DNA 殘留；
化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90 s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入900 μL LB或SOC培養基（室溫或37 ℃預熱），然后置于37 ℃搖床復壯45 min；
5. 取不同體積的轉化產物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養箱培養過夜。
DH10B plus 化轉克隆感受態
注意事項
1. 感受態細胞冰水浴中解凍后應立即使用；
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態細胞體積的 1/10；
3. 加入待轉化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態細胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保.高轉化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。
產品簡介
本品為使用大腸桿菌 DH10B 菌株制備的高效化學感受態細胞，轉化效率可達 108 cfu/μg DNA，被廣
泛用于質粒轉化、基因克隆等；可以使用藍白斑篩選。
產品組成
組分
CC96101-01
CC96101-02
CC96101-03
DH10B 感受態細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：F- mcrA ?(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZ?M15 ?lacX74 recA1 endA1 araD139 ?(ara, leu)7697
galE15 galK λ- rpsL nupG
存儲條件
-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
產品特性
-來源于 MC1061 菌株，可用于基因克隆等；
-rpsL 突變賦予 DH10B 菌株鏈霉素抗性；
-藍白斑篩選時，需在平板上預先涂布 IPTG 和 X-gal；
-mcrA、mcrBC 及 mrr 突變使 DH10B 菌株適合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的 DNA ；
-由于 recA1 和 endA1 的突變，因此該菌株的重組率較低，有利于插入 DNA 的穩定，故常用于克隆
質粒的保存和高純度質粒 DNA 的提取。
質量控制
無外源質粒 DNA 殘留；
化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90 s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入900 μL LB或SOC培養基（室溫或37 ℃預熱），然后置于37 ℃搖床復壯45 min；
5. 取不同體積的轉化產物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養箱培養過夜。
注意事項
1. 感受態細胞冰水浴中解凍后應立即使用；
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態細胞體積的 1/10；
3. 加入待轉化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態細胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保.高轉化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。
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