2× FastPfu Premix 酶

是將PCR反應中用到的高保真FastPfu DNA聚合酶、buffer、dNTP Mixture以及穩定劑以2倍的終濃度進行混合。使用時，只需要在制品溶液中加入模板和引物便可進行PCR反應，大大簡化了操作過程，降低了PCR操作過程中污染的可能性。

 2× FastPfu Premix 酶 

1. 在冰浴上設置 PCR 反應（供參考）*：

模板: < 500 ng

2× Tolo FastPfu Premix: 25 μL

Primer 1/2: 0.2 - 1.0 μM (final conc.)

滅菌蒸餾水 Up to 50 μL

2. PCR 反應參數（供參考）**：

(起始變性): 95 ℃  5 min

(解鏈): 98 ℃  5 sec

(退火): 55 ℃ 30 sec

(延伸): 72 ℃ x min （30-35 循環：2 kb/min）

(終延伸): 72 ℃  7 min

(臨時保存): 16 ℃ 保溫

(終延伸): 72 ℃ 10 min 

* 針對不同類型的模板，所需的模板量會有不同，如基因組和質粒，等等；需要根據實際情況，添加合適的模板量。

** 退火溫度需根據引物和模板實際的 G+C 含量來作調