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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
支氣管組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7055 |
細胞簡介：
人支氣管平滑肌分離自支氣管組織；支氣管（Bronchi），是指由支氣管分出的各級分枝，由支氣管分出的一級支氣管，即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較，前者較細長，走向傾斜；后者較粗短，走向較前者略直，所以經支氣管墮入的異物多進入右主支氣管。支氣管和支氣管還有以區別就是，支氣管是以“C"型的支氣管軟骨為支架，而支氣管不是。支氣管平滑肌細胞主要功能：①支氣管平滑肌細胞能維持支氣管張力，保持支氣管形態；②支氣管平滑肌特異的超微結構特點和調節機制是支氣管正常生理功能的基礎；③支氣管平滑肌通過分泌細胞因子和趨化因子等促炎介質，發揮免疫調節功能。支氣管平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。
方法簡介：
公司實驗室分離的人支氣管平滑肌采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的人支氣管平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態優良
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品：
小鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
小鼠L苯解酶(PAL)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
小鼠KN-62試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
小鼠I型膠原蛋白（COL-1）試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
小鼠骨膠原交聯(Cr)ELISA 試劑盒
Rat annexin V (ANX- V) ELISA Kit 大鼠膜聯蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)試劑盒
Humansecretieceptor,SRELISAKit 人促胰液素/分泌素受體(SR)試劑盒 進口分裝
Humanai-Reticulinaibody,ARA試劑盒人抗網硬蛋白抗體(ARA)試劑盒
植物細胞原生質體電轉試劑盒10次
HumaumornecrosisfactorsolublereceptorⅡ,TNFsR-ⅡELISAKit人壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)試劑盒
CTAGE6蛋白抗體
甘油磷酸二酯酶磷酸結構域3抗體
CSF1R重組大鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (His 標簽) Protein
DBH (Dopamine- Beta-Hydroxylase 0.5mgDBH (Dopamine- Beta-Hydroxylase) 多巴胺β羥化酶(抗原)
FABP3重組人 FABP3 / H-FABP / M-FABP 蛋白 Protein
FAM3B Protein Human 重組人 FAM3B 蛋白
TIMD4 Protein Mouse 重組小鼠 TIM4 / TIMD4 蛋白 (His 標簽)
DBH (Dopamine- Beta-Hydroxylase 0.5mgDBH (Dopamine- Beta-Hydroxylase) 多巴胺β羥化酶(抗原)
FAM3B Protein Human 重組人 FAM3B 蛋白
CSF1R重組大鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (His 標簽) Protein
TIMD4 Protein Mouse 重組小鼠 TIM4 / TIMD4 蛋白 (His 標簽)
FABP3重組人 FABP3 / H-FABP / M-FABP 蛋白 Protein
人支氣管平滑肌細胞大鼠葡萄糖轉運蛋白3(GL3)試劑盒 ，英文名： GL3 ELISA Kit
Mouse heme oxygenase 1 (HO-1) ELISA Kit 小鼠血紅素氧合酶1(HO-1)試劑盒
Ratlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISAKit 大鼠脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforGP-MM(MouseGlycogenphosphorylaseMM)ELISAKit小鼠糖原0酸化酶同工酶MM
細胞蛋酸酶2A(PP2A)活性比色法定量試劑盒20次(10個樣本)
RatToll-likereceptor9,TLR-9ELISAKit大鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)試劑盒
原代細胞的培養條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發生脫落，漂浮；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
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