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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
腎組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 內皮細胞樣 | YS-01X7259 |
細胞簡介：
人腎動脈內皮分離自腎組織；腎臟是機體的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內代謝產物及某些廢物、毒物，同時經重吸收功能保留水份及其他有用物質，如葡萄糖、蛋白質、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等，以調節水、電解質平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內分泌功能，生成腎素、促紅細胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等，又為機體部分內分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機體內環境的穩定，使新陳代謝得以正常進行。腎動脈的分支為葉間動脈，穿行于腎柱內，上行至皮質與髓質交界處，形成與腎表面平行的弓狀動脈。小葉間動脈向被膜發出毛細血管，并向周圍的腎小體發出入球小動脈，進入腎小囊后形成球形的毛細血管網，再匯集成出球小動脈，出腎小體。直小動脈分支形成毛細血管網，再匯合成直小靜脈，入弓狀靜脈、葉間靜脈，最后匯合成腎靜脈經腎門出腎，注入下腔靜脈。腎動脈既是腎的營養血管，又是腎的機能血管，與腎泌尿機能密切相關。腎動脈在腎實質內形成兩個毛細血管網：腎小球毛細血管網，血壓較高，利于血漿濾過形成原尿；球后毛細血管網，血壓較低，利于腎小管的重吸收。腎動脈內皮細胞是腎動脈的重要結構細胞之一，在機體的正常生理過程中發揮著重要作用。腎動脈內皮細胞主要功能有：①在血漿濾過形成原尿的過程中起重要作用，②在腎小管的重吸收過程中起重要作用，③保持凝血和纖溶的動態平衡。
方法簡介：
公司實驗室分離的人腎動脈內皮采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的人腎動脈內皮經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品：
小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISAKit ELISA.
小鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISAKit ELISA.
小鼠交聯物(PY)ELISAKit ELISA.
小鼠骨橋素(OPN)ELISAKit ELISA.
小鼠干細胞因子受體(SCFR)ELISA 試劑盒
Human aquaporin 1 (AQP-1) ELISA Kit 人水通道蛋白1(AQP-1)試劑盒
HumancoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-AgELISAKit 人Ⅷ相關抗原(Ⅷ-Ag)試劑盒 進口分裝
Humanapelin12,AP12試劑盒人apelin12(AP12)ELISAKi
植物氧化應激活性氧(ROS)魯米諾化學發光法定量試劑盒50次
HumaotalproteinS,TPSELISAKit人總蛋白S(TPS)試劑盒
胰島細胞自身抗原相關蛋白PTPRN2抗體
PE標記小鼠CD154單克隆抗體
FCGR2重組小鼠 CD32 / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標簽), Biotinylated Protein
ADAMTS7 peptide/HRP 辣根過氧化物酶標記整合素樣金屬蛋白酶與1型-7抗原 1mgADAMTS7 peptide/HRP 辣根過氧化物酶標記整合素樣金屬蛋白酶與1型-7抗原
TFAP2C重組人 TFAP2C / AP2-GAMMA 蛋白 (His 標簽) Protein
FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His & AVI 標簽)
CD14 Protein Rat 重組大鼠 CD14 蛋白
次0酸核糖基轉移酶1(HPRT1)重組蛋白 Recombinant Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase 1 (HPRT1)
FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His & AVI 標簽)
S100A9重組小鼠 S100A9 / CAGB / p14 蛋白 (His 標簽) Protein
IFNAR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 (His 標簽)
ALOX15B重組人 ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 蛋白 Protein
人腎動脈內皮細胞大鼠髓鞘關聯糖蛋白(MAG)試劑盒 ，英文名： MAG ELISA Kit
Mouse glycogen phosphorylase II (GP-II) ELISA Kit 小鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)試劑盒
raesistinELISAKit 大鼠抵抗素(Resistin)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforHIT(Humanheparinassociatedaibody)ELISAKit人抗肝素PF4復合物抗體/HIT抗體
細胞RCT激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKit5-大鼠5核苷酸酶
原代細胞的培養條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發生脫落，漂浮；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
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