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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
肝臟組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7168 |
細胞簡介：
人肝內膽管上皮分離自肝臟組織；肝臟是身體內以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用；肝臟也制造消化系統中之膽汁。肝臟是機體內臟里的器官，位于機體中的腹部位置，在右側橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機體消化系統中的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態結構：肝臟位于右上腹，隱藏在右側膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復蓋，僅在腹上區、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。通過控制激素調控的分泌和吸收，在保持、調整和擴大膽小管的結構中發揮重要作用，肝內膽管上皮細胞在先天性和獲得性免疫應答方面起著積極作用。肝內膽管上皮細胞約占肝細胞總數的5%，其在肝內膽道系統內形成復雜的網狀管形結構。肝內膽管上皮細胞具有復雜的生理代謝功能，參與肝臟的代謝、排泌、免疫等生理過程，在肝臟疾病的發生發展過程中起一定的作用。研究表明，常見的肝內膽管病變例如原發性硬化性膽管炎、膽管癌等疾病，都是以肝內膽管上皮細胞為病變靶位，進而引起肝內膽管上皮損傷。因此，了解正常肝內膽管上皮細胞的生物學特征和病變肝內膽管上皮細胞的病理特征對研究肝內膽管病變的發病機制、診斷和治療具有重要意義。
方法簡介：
公司實驗室分離的人肝內膽管上皮采用膠原酶灌注消化法后，再用膠原酶-DNA酶聯合消化，接種至預先包被鼠尾膠原的培養瓶中，通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的人肝內膽管上皮經Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品：
兔子脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子組織因子(TF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子骨膠原交聯(Cr)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子組織多肽抗原(TPA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠苯(LPA)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human general anscription complex (GTC) ELISA Kit 人通用轉錄復合體(GTC)試劑盒
HumanCyclin-dependekinase4,CDK-4ELISAKit 人周期素依賴性激酶4(CDK-4)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanbreastcancersusceptibilityprotein1,BRCA-1試劑盒人癌易感蛋白1(BRCA-1)試劑盒規格：96T/48T
植物組織細胞核高分離試劑盒10次
HumanSpecifieMacrophageArmingPaetot,SMAFELISAKit人特異性巨噬細胞武裝因子(SMAF)試劑盒規格：96T/48T
胚胎干細胞關鍵蛋白2抗體
周期素依賴性激酶9抗體
LGMN重組野豬 Legumain / LGMN / AEP 蛋白 Protein
NF2/merlin(neurofibromatosis type 2 0.5mgNF2/merlin(neurofibromatosis type 2) 2型神經纖維瘤抗原
TNFRSF8重組人 CD30 / TNFRSF8 蛋白 Protein
GADD45G Protein Human 重組人 GADD45G / CR6 蛋白
CCNE1 Protein Mouse 重組小鼠 CCNE1 / Cyclin-E1 蛋白 (His & GST 標簽)
NF2/merlin(neurofibromatosis type 2 0.5mgNF2/merlin(neurofibromatosis type 2) 2型神經纖維瘤抗原
GADD45G Protein Human 重組人 GADD45G / CR6 蛋白
LGMN重組野豬 Legumain / LGMN / AEP 蛋白 Protein
CCNE1 Protein Mouse 重組小鼠 CCNE1 / Cyclin-E1 蛋白 (His & GST 標簽)
TNFRSF8重組人 CD30 / TNFRSF8 蛋白 Protein
人肝內膽管上皮細胞大鼠血小板內皮細胞粘附分子1(PECAM1)試劑盒 ，英文名： PECAM1 ELISA Kit
Mouse coagulation (F x) ELISA Kit 小鼠Ⅹ(FⅩ)試劑盒
MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein4,IGFBP-4ELISAkit 小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白4(IGFBP-4)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumancoagulationfactorIX,FIXELISAKit人Ⅸ
細胞CDK5/P35激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitCR大鼠鈣結合蛋白
原代細胞的培養條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發生脫落，漂浮；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
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