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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
肺靜脈組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 內皮細胞樣 | YS-01X7011 |
細胞簡介：
人肺大靜脈內皮分離自肺大靜脈組織；肺大靜脈在用肺呼吸的脊椎動物中，把動脈血由肺送回心臟的靜脈，是一個靜脈里流動脈血的血管。左右1對，共4條，兩條連接右肺，兩條連接左肺。肺靜脈異位引流是指肺靜脈未能直接與左心房連接，而與右心房或體靜脈系統連接的先天性心血管異位。肺靜脈淤血性肺動脈高壓，是由于肺靜脈內血液淤滯而引起的肺動脈高壓。正常情況下，肺循環具有血壓低、阻力小和順應性大的特點，肺動脈壓力高低取決于單位時間內肺動脈血流量和肺血管的阻力，要維持肺循環的低壓、低阻的狀態，必須保證整個肺循環系統的暢通無阻，血液順利地由肺動脈經毛細血管進入肺靜脈，再入左心室，經過左心室收縮進入體循環，才能避免肺動脈內壓力升高。細胞呈多邊形鵝卵石狀排列；該細胞在維持血管內外的動態平衡、合成和分泌細胞因子和介質、維持凝血和纖溶的動態平衡中起重要作用。
方法簡介：
公司實驗室分離的人肺大靜脈內皮采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的人肺大靜脈內皮經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
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器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品：
小鼠嗜環蛋白/親環素A(CyPA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠淋巴細胞因子ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠抗利尿激素/血管加壓素/精酸加壓素(ADH/VP/AVP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠酸激酶(PK)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat hydrocoisone (HYD) ELISA Kit 大鼠輕化1(HYD)試劑盒
HumanHexokinase,HKELISAKit 人己糖激酶(HK)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanBone-specificAlkphaseB,ALP-B試劑盒人骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)試劑盒規格：96T/48T
植物組織可溶性總蛋白制備試劑盒20次
HumanSS-B/LaAibody,ELISAKit人抗SS-B/La抗體試劑盒規格：96T/48T
氯離子通道蛋白2抗體
粘蛋白19抗體
RBP4重組大鼠 RBP4 蛋白 Protein
HPV16-E6/E6 protein(Human papillomavirus type 16 0.5mgHPV16-E6/E6 protein(Human papillomavirus type 16) 人類狀瘤病毒16抗原
PDE4B重組人 PDE4B / DPDE4 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
CLDN11 Protein Human 重組人 CLDN11 / Claudin-11 蛋白 (Fc 標簽)
IFNA14 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA14 / Interferon alpha-14 蛋白 (Fc 標簽)
HPV16-E6/E6 protein(Human papillomavirus type 16 0.5mgHPV16-E6/E6 protein(Human papillomavirus type 16) 人類狀瘤病毒16抗原
CLDN11 Protein Human 重組人 CLDN11 / Claudin-11 蛋白 (Fc 標簽)
RBP4重組大鼠 RBP4 蛋白 Protein
IFNA14 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA14 / Interferon alpha-14 蛋白 (Fc 標簽)
PDE4B重組人 PDE4B / DPDE4 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
人肺大靜脈內皮細胞大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白2(IGFBP2)試劑盒 ，英文名： IGFBP2 ELISA Kit
Mouse visfatin / visfatin (visfatin) ELISA Kit 小鼠內脂素/內臟脂肪素(visfatin)試劑盒
MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor1,VEGFR-1ELISAkit 小鼠血管內皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanCTX-2ELISAKit人骨退化特異標志物
細胞a-(a-AMYLASE)活性CNPG3比色法定量試劑盒20次
ELISAKitOPN大鼠骨橋素
原代細胞的培養條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發生脫落，漂?。?/p>
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
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