詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
下腔靜脈組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 內皮細胞樣 | YS-01X7634 |
細胞簡介:
大鼠下腔靜脈內皮分離自下腔靜脈組織;下腔靜脈是體內大的靜脈,收集下肢、盆部和腹部的靜脈血。下腔靜脈由左、右髂總靜脈匯合而成,匯合部位多在第5腰椎水平,少數平第4腰椎。下腔靜脈位于脊柱的右前方,沿腹主動脈的右側上行,經肝的腔靜脈溝、穿 膈的腔靜脈孔,開口于右心房。下腔靜脈的前面有肝、胰頭、十二指腸水平部、右睪丸動脈及小腸系膜根越過。后面為有膈腳、第1~4腰椎、有腰交感干和腹主動脈的壁支。右側與 腰大肌、右腎、右腎上腺相鄰,左側為腹主動脈。下腔靜脈的屬支有髂總靜脈、右睪丸靜脈、腎靜脈、右腎上腺靜脈、肝靜脈、膈下靜脈和腰靜脈,其中大部分 屬支與同名動脈伴行。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠下腔靜脈內皮采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠下腔靜脈內皮經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
兔型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)試劑盒 96T/48T
兔型纖溶酶原激活物(uPA)試劑盒 96T/48T
兔內皮型合成酶(eNOS)試劑盒 96T/48T
兔內皮素(Endothelin-1)試劑盒 96T/48T
小鼠P21蛋白(P21)試劑盒 96T/48T
Rat glycogen phosphorylase isoenzyme II (GP-II) ELISA Kit 大鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)試劑盒
HumanFreeTestoterone,F-TESTOELISAKit 人游離睪酮(F-TESTO)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumancoagulationfactorⅩⅢ,FⅩⅢ試劑盒人ⅩⅢ(FⅩⅢ)試劑盒規格:96T/48T
組蛋白轉甲基酶活性試劑盒(H3-K9)20次
HumaeninELISAKit人腎素(Renin)試劑盒規格:96T/48T
肺Kruppel樣因子抗體
軟骨肉瘤相關蛋白1抗體
KLK13重組人 KLK13 / Kallikrein-13 蛋白 Protein
胎盤堿性0酸酶(ALPP)重組蛋白 Recombinant Alkaline Phosphatase, Placental (ALPP)
SEMA3A重組人 Semaphorin 3A / SEMA3A 蛋白 (Fc 標簽) Protein
HIST1H3A Protein Human 重組人 Histone H3.1 / HIST1H3A / H3FA 蛋白
HA Protein H11N2 重組甲型流感 H11N2 (A/duck/Yangzhou/906/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
胎盤堿性0酸酶(ALPP)重組蛋白 Recombinant Alkaline Phosphatase, Placental (ALPP)
HIST1H3A Protein Human 重組人 Histone H3.1 / HIST1H3A / H3FA 蛋白
KLK13重組人 KLK13 / Kallikrein-13 蛋白 Protein
HA Protein H11N2 重組甲型流感 H11N2 (A/duck/Yangzhou/906/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
SEMA3A重組人 Semaphorin 3A / SEMA3A 蛋白 (Fc 標簽) Protein
大鼠下腔靜脈內皮細胞大鼠組織轉谷酰胺酶(TGM2)試劑盒 ,英文名: TGM2 ELISA Kit
Mouse ai alpha fodrin aibody IgG/IgA (-Fodrin IgG/IgA) ELISA Kit 小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)試劑盒
MousehepatitisBviruseaigen,HBeAgELISAKit 小鼠乙型肝e抗原(HBeAg)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanmembranecofactorprotein,MCPELISAKit人膜輔蛋白
透射電鏡(TEM)通用載網組織樣品陰性染色試劑盒20次
ELISAKitsP-selectin大鼠可溶性P選擇素
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。