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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
腎組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7240 |
細胞簡介：
大鼠腎小管上皮分離自腎組織；腎臟是機體的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內代謝產物及某些廢物、毒物，同時經重吸收功能保留水份及其他有用物質，如葡萄糖、蛋白質、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等，以調節水、電解質平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內分泌功能，生成腎素、促紅細胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等，又為機體部分內分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機體內環境的穩定，使新陳代謝得以正常進行。腎小管是機體腎臟器官上與腎小囊壁層相連的一條細長上皮性小管，具有重吸收（reabsorption）和排泌作用。腎小管按不同的形態結構、分布位置和功能分成近端小管、髓袢和遠端小管三部分；近端小管可分為直部和曲部，曲部也稱為近曲小管，位于皮質迷路內，于腎小體附近高度蟠曲；遠端小管曲部也稱為遠曲小管，位于皮質迷路內。腎小管上皮細胞是腎小管外面的一層細胞，腎小管上皮細胞的分離、培養是研究腎臟疾病的一項重要技術，目前該分離方法有酶分離法、化學分離法篩網分離法、顯微解剖分離法、流式細胞儀分離法等。腎小管上皮細胞主要功能：①腎小管上皮細胞重吸收原尿中幾乎全部的葡萄糖和氨基酸；②排泌非營養物質進入終尿；③細胞能分泌炎癥介質如細胞因子和趨化因子，通過產生IL-8或直接趨化白細胞參與急性炎癥反應；④移植腎炎癥和新月體腎炎中PTEpiC表達IL-2R和MHC-Ⅱ類抗原，這說明腎小管上皮細胞參與腎免疫損傷的發生。隨著對腎間質纖維化機制研究的日漸加深，腎小管上皮細胞（RTECs）在其中的作用日益被人們重視。因此，提供良好的腎小管上皮細胞模型，在腎小管間質疾病的發病機制和治療藥物篩選的研究中是非常重要的。
原代細胞的培養條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發生脫落，漂浮；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠腎小管上皮采用先機械研磨過不銹鋼網篩分離得到腎小管、后用膠原酶消化，結合上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的大鼠腎小管上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品：
小鼠心肽(ANP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠毒性休克綜合征毒素1(TSST-1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠A(CsA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠細胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human lymphocyte factor ELISA Kit 人淋巴細胞因子試劑盒
Humanα-enolaseELISAKit 人α烯醇化酶(α-enolase)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Chickeninfectiouscoryza,ic試劑盒雞傳染性鼻抗體(IC)試劑盒規格：96T/48T
載玻片細胞CYTOCHROMEC蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MousegranzymesB,Gzms-BELISAKit小鼠顆粒酶B(Gzms-B)試劑盒規格：96T/48T
背神經管核蛋白抗體
膜相關鳥苷酸反轉激酶1抗體
TGFBR3重組小鼠 TGFBR3 / Betaglycan 蛋白 Protein
免疫球蛋白G(IgG)天然蛋白 Native Immunoglobulin G (IgG)
KDM1A重組人 KDM1 / LSD1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
CDH17 Protein Human 重組人 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 蛋白
TDGF1 Protein Rat 重組大鼠 Cripto / TDGF1 蛋白 (Fc 標簽)
免疫球蛋白G(IgG)天然蛋白 Native Immunoglobulin G (IgG)
CDH17 Protein Human 重組人 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 蛋白
TGFBR3重組小鼠 TGFBR3 / Betaglycan 蛋白 Protein
TDGF1 Protein Rat 重組大鼠 Cripto / TDGF1 蛋白 (Fc 標簽)
KDM1A重組人 KDM1 / LSD1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
大鼠腎小管上皮細胞人總膽汁酸(TBA)試劑盒
People of heterogeneous ribonucleoprotein complex (hNP/RA3 / ai RA33 aibody 人異質型核糖核蛋白復合物/抗RA33抗體(hNP/RA3
HumangranzymesA,Gzms-AELISAKit 人顆粒酶A(Gzms-A)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanheparinsulphateprotoglycans,HSPG試劑盒人肝素糖蛋白(HSPG)試劑盒規格：96T/48T
組織元素比色法定量試劑盒20次
HumanmajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/HLA-ⅡELISAKit人主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)試劑盒規格：96T/48T
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