化工儀器網
詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
腎動脈組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7238 |
細胞簡介：
大鼠腎動脈平滑肌分離自腎動脈組織；腎動脈的分支為葉間動脈，穿行于腎柱內，上行至皮質與髓質交界處，形成與腎表面平行的弓狀動脈。小葉間動脈向被膜發出毛細血管，并向周圍的腎小體發出入球小動脈，進入腎小囊后形成球形的毛細血管網，再匯集成出球小動脈，出腎小體。直小動脈分支形成毛細血管網，再匯合成直小靜脈，入弓狀靜脈、葉間靜脈，后匯合成腎靜脈經腎門出腎，注入下腔靜脈。腎動脈既是腎的營養血管，又是腎的機能血管，與腎泌尿機能密切相關。腎動脈在腎實質內形成兩個毛細血管網：腎小球毛細血管網，血壓較高，利于血漿濾過形成原尿；球后毛細血管網，血壓較低，利于腎小管的重吸收。腎動脈平滑肌細胞是腎動脈的重要結構細胞之一，在機體的正常生理過程中發揮著重要作用。腎動脈平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。
原代細胞的培養條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發生脫落，漂浮；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠腎動脈平滑肌采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的大鼠腎動脈平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品：
植物激素脫落酸（ABA）ELISAKit ELISA.
植物K1(VK1)ELISAKit ELISA.
植物B12(VB12)ELISAKit ELISA.
植物A(VA)ELISAKit ELISA.
植物纖維素酶(CE)試劑盒
Human ai calmodulin specific aibody (CAM-ab) ELISA Kit 人抗鈣調素特異抗體(CAM-ab)試劑盒
Porcineendothelin1,ET-1ELISAKit 豬內皮素1(ET-1)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAFP-L3ELISAKit小鼠小扁結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體3
血液A含量比色法定量試劑盒20次
Mousethyroidstimulatinghormonereceptoraidoby,AbELISAKit小鼠抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)試劑盒
白介素21受體抗體
卵泡刺激素結合蛋白1抗體
ERBB3重組人 HER3 / ErbB3 蛋白 Protein
三葉因子1(TFF1)重組蛋白 Recombinant Trefoil Factor 1 (TFF1)
DHRS9重組人 DHRS9 蛋白 (His 標簽) Protein
ADH7 Protein Human 重組人 CAMK2A / CAMKA 蛋白 (GST 標簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 蛋白
三葉因子1(TFF1)重組蛋白 Recombinant Trefoil Factor 1 (TFF1)
ADH7 Protein Human 重組人 CAMK2A / CAMKA 蛋白 (GST 標簽)
ERBB3重組人 HER3 / ErbB3 蛋白 Protein
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 蛋白
DHRS9重組人 DHRS9 蛋白 (His 標簽) Protein
大鼠腎動脈平滑肌細胞人組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA 試劑盒
Rat apolipoprotein B100 (apo-B100) ELISA Kit 大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)試劑盒
Humanai-hepatitisDvirusaibody,ai-HDVELISAKit 人抗丁型肝病毒抗體(ai-HDV)試劑盒 進口分裝
HumanHeatShockProtein60,HSP-60試劑盒人熱休克蛋白60(Hsp-60)試劑盒
組織副氏菌A(SalmonellaParatyphiA)定量PCR擴增試劑盒20次
HumanMaixmetalloproteinase3,MMP-3ELISAKit人基質金屬蛋白酶3(MMP-3)試劑盒
化工儀器網