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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
眼角膜組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7387 |
細胞簡介：
大鼠角膜上皮分離自眼角膜組織；角膜位于眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜的前1/6，從后面看角膜呈正圓形，從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同，中央部最薄。角膜有十分敏感的神經末梢，如有外物接觸角膜，眼瞼便會不由自主地合上以保護眼睛。為了保持透明，角膜并沒有血管，透過外界空氣、淚液及房水獲取養份及氧氣。角膜分為五層，由前向后依次為：上皮細胞層、前彈力層、基質層、后彈力層、內皮細胞層。其主要功能如下：①角膜是的無血管的組織，具有透明的特性和合成許多蛋白的功能，分三層細胞層，外層即是上皮細胞；②角膜上皮細胞能參與先天性免疫，能感應病原體存在并發出信號從而激活角膜防御系統；③角膜上皮細胞能高效表達醛脫氫酶。角膜上皮細胞的體外培養對研究角膜的生理學、病理學、免疫學以及分子生物學都是極為重要的手段，常用于研究細胞代謝產物、病毒感染、各種生長因子和藥物對細胞生長的影響。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠角膜上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的大鼠角膜上皮經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品：
脂肪型脂肪酸結合蛋白 (FABP4) 作用： ELISA 規格： 進口分裝
凋亡相關因子 (Fas/Apo-1) 作用： ELISA 規格： 進口分裝
凋亡相關因子配體 (Fas-L) 作用： ELISA 規格： 進口分裝
胎球蛋白 -A(Fetuin-A) 作用： ELISA 規格： 進口分裝
植物B12(VB12)ELISA 試劑盒
Human ai somatic muscle aibody (ASA) ELISA Kit 人抗骨骼肌抗體(ASA)試劑盒
PorcineVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAKit 豬血管內皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAFP甲胎蛋白定量(一/二步夾心法)
血液血管緊張素Ⅰ轉化酶1(ACE1)活性熒光定量試劑盒20次
MouseTestoterone,TELISAKit小鼠睪同(T)試劑盒
FITC標記人CD117 (c-kit)單克隆抗體
核抑制蛋白磷酸酶1抗體
ANGPTL4重組小鼠 ANGPTL4 蛋白 (His 標簽) Protein
基質金屬蛋白酶26(MMP26)重組蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 26 (MMP26)
SIGLEC6重組人 SIGLEC6 / CD327 蛋白 Protein
ACVR2A Protein Human 重組人 ACVR2 / ACTRII / ACVR2A 蛋白 (His 標簽)
IL12B Protein Marmoset 重組絨猴 IL12B / IL-12B 蛋白
基質金屬蛋白酶26(MMP26)重組蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 26 (MMP26)
ACVR2A Protein Human 重組人 ACVR2 / ACTRII / ACVR2A 蛋白 (His 標簽)
ANGPTL4重組小鼠 ANGPTL4 蛋白 (His 標簽) Protein
IL12B Protein Marmoset 重組絨猴 IL12B / IL-12B 蛋白
SIGLEC6重組人 SIGLEC6 / CD327 蛋白 Protein
大鼠角膜上皮細胞小鼠αN已酰基葡糖苷酶(αNAG)ELISA 試劑盒
Rat aquaporin 3 (AQP-3) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白3(AQP-3)試劑盒
Humanplacealactogen,HPLELISAKit 人胎盤催乳素(HPL)試劑盒 進口分裝
HumanChromogranin,CgA試劑盒人嗜鉻蛋白A(CgA)試劑盒
總脂肪酶(lipase)定量試劑盒50次
Humansalivaryductaoaibody,SDAELISAKit人抗唾液腺導管組織抗體(SDA)試劑盒
原代細胞的培養條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發生脫落，漂浮；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
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