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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
呼吸道 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7502 |
細胞簡介：
大鼠呼吸道上皮分離自呼吸道；呼吸道是肺呼吸時氣流所經過的通道，有肺脊椎動物的呼吸道分上、下兩部：鼻、咽和喉合稱上呼吸道。氣管及其以后一分再分的管道，合稱為下呼吸道，或稱為氣管樹。氣管樹是隨著動物的進化逐漸復雜化的。整個呼吸道內表面都分布有分泌液和纖毛（鼻孔、咽后壁和聲帶黏膜除外），它能溫暖（或冷卻）、濕潤和凈化吸入的空氣，對于呼吸器官和機體有著保護作用。呼吸道以骨或軟骨做支架，其內表面覆蓋著黏膜，黏膜內分布著豐富的毛細血管。呼吸道上皮細胞屬于假復層纖毛柱狀上皮，分布于呼吸道的內表面，主要由柱狀，杯形，梭形和錐形等不同形狀細胞組成。看上去像復層上皮，但實際上所有細胞底部均附于基膜上，屬單層上皮，故稱假復層柱狀上皮，上皮表面有纖毛，杯狀細胞可分泌粘液，包裹著大量細菌，借助纖毛不斷擺動將其慢慢移動至出消化道。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠呼吸道上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的大鼠呼吸道上皮經pan-cytokeratin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品：
木聚糖酶測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
酸性木聚糖酶測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
堿性木聚糖酶測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
β-木糖苷酶測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
豬雌激素(E)ELISA 試劑盒
Human macrophage inflammatory protein 3 alpha (MIP-3 alpha /CCL20) ELISA Kit 人巨噬細胞性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)試劑盒
Porcinegasieceptor,GsaRELISAKit 豬促胃液素受體(GsaR)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforALP-B(MouseBone-specificAlkphaseB)ELISAKit小鼠骨特異性堿性0酸酶B
血液0酸二酯酶5(PDE5)活性酶連續循環定0比色法定量試劑盒20次
Mouseα-Glucosidase,a-GluELISAKit小鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)試劑盒
CD71單克隆抗體
甘油激酶抗體
TNFRSF13C重組大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 蛋白 Protein
Cyclin D2 周期素D2抗原 0.5mgCyclin D2 周期素D2抗原
TXN重組人 Thioredoxin / TXN / SASP 蛋白 Protein
ALDOB Protein Human 重組人 ALDOB / Aldolase B 蛋白 GST 標簽
NT5E Protein Mouse 重組小鼠 CD73 / NT5E 蛋白 (His 標簽)
Cyclin D2 周期素D2抗原 0.5mgCyclin D2 周期素D2抗原
ALDOB Protein Human 重組人 ALDOB / Aldolase B 蛋白 GST 標簽
TNFRSF13C重組大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 蛋白 Protein
NT5E Protein Mouse 重組小鼠 CD73 / NT5E 蛋白 (His 標簽)
TXN重組人 Thioredoxin / TXN / SASP 蛋白 Protein
大鼠呼吸道上皮細胞小鼠半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA 試劑盒
Rat aldosterone (ALD) ELISA Kit 大鼠固酮(ALD)試劑盒
Humanexacellularsignal-regulatedkinase,ERKELISAKit 人細胞外信號調節激酶(ERK)試劑盒 進口分裝
HumanBrucellaAibodyIgG,BrucellaAbIgG試劑盒人菌抗體IgG(BrucellaAbIgG)試劑盒
植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒10/20次
Humansolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISAKit人可溶性血管內皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)試劑盒
原代細胞的培養條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發生脫落，漂浮；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
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