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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
臍帶 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 內皮細胞樣 | YS-01X8522 |
細胞簡介：
小鼠臍動脈內皮分離自臍帶組織；它是臍動脈的重要結構組成細胞之一，在機體的正常生理過程中發揮著重要作用。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結構，臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈，卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中，子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管，與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近，在此處母體和胎兒的血液間進行CO2和O2，代謝產物即代謝廢物和營養物質的交換。臍動脈將胎兒產生的廢物運送至胎盤，臍靜脈將O2和營養物質從胎盤運送給胎兒。
方法簡介：
實驗室分離的小鼠臍動脈內皮采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
實驗室分離的小鼠臍動脈內皮經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態：內皮細胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%
培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
小鼠臍動脈內皮體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品：
大鼠固(ALD)ELISAKit ELISA.
大鼠去甲上腺素(NA)ELISAKit ELISA.
大鼠前列腺素F(PGF)ELISAKit ELISA.
KLHDC8B蛋白抗體
鉀通道四聚體結構域蛋白11抗體
CD274重組大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白 (His 標簽) Protein
CREB-1 (cAMP responsive element binding protein-1 0.5mgCREB-1 (cAMP responsive element binding protein-1) 環腺苷酸應答元件結合蛋白(抗原)
CSF3R重組人 G-CSFR / CD114 蛋白 (His 標簽) Protein
AK1 Protein Human 重組人 AK1 / Adenylat僀?僀
CREB-1 (cAMP responsive element binding protein-1 0.5mgCREB-1 (cAMP responsive element binding protein-1) 環腺苷酸應答元件結合蛋白(抗原)
AK1 Protein Human 重組人 AK1 / Adenylate kinase 1 蛋白 (His 標簽)
CD274重組大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白 (His 標簽) Protein
NTRK3 Protein Mouse 重組小鼠 TrkC / NTRK3 蛋白 (His 標簽)
CSF3R重組人 G-CSFR / CD114 蛋白 (His 標簽) Protein
豬白介素12(IL-12)試劑盒
Human ai Sp100 aibody (Sp100) ELISA Kit 人抗sp100抗體(sp100)試劑盒
PorcineIerleukin18,IL-18ELISAKit 豬白介素18(IL-18)試劑盒分裝
CLIAKitforAIF(Humanapoptosisinducingfactor)ELISAKit人凋亡誘導因子
血液/活化II(THROMBIN/FACTORIIa)活性熒光定量試劑盒20次
MouseUbiquitin,UbELISAKit小鼠泛素蛋白(Ub)試劑盒
小鼠臍動脈內皮細胞豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISA 試劑盒
Rat angiotensin II (ANG- II) ELISA Kit 大鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)試劑盒
humansinglesandedDNAAibody,ssDNAELISAKit 人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)試劑盒分裝
HumanCyclin-dependekinase7,CDK-7試劑盒人周期素依賴性激酶7(CDK-7)試劑盒
組織GSK3α激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanPolymorphonuclearElastase,PMNElastaseELISAKit人多形核白細胞彈性蛋白酶(PMNElastase)試劑盒
原代細胞的培養條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發生脫落，漂浮；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
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