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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
乳腺組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7086 |
細胞簡介：
小鼠乳腺上皮分離自乳腺組織；乳腺是復管泡狀皮膚腺，主要由腺上皮細胞組成，并具有特殊的泌乳功能。在妊娠期，導管末梢發育成腺泡；近年來的許多研究都表明乳腺癌、乳腺炎等的發生都與乳腺上皮細胞（MEC）有密切聯系，體外分離培養MECs即成為研究開展的關鍵步驟。乳腺是乳房的腺體組織，乳腺由導管和腺泡組成，腺泡是分泌乳汁的重要部分。乳腺的正常發育是由體內激素和局部合成的生長因子共同調控，其中乳腺表達的生長因子對乳腺上皮細胞的增殖、分化、凋亡產生極大的影響。乳腺上皮分離自分娩后3-5天的乳腺組織，為貼壁生長型細胞，呈多角形、圓形以及短梭形；乳腺上皮細胞主要功能即生乳功能。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠乳腺上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的小鼠乳腺上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品：
載脂蛋白B（ApoB）測定試劑盒（免疫比濁法）
載脂蛋白A-I（ApoA-I）測定試劑盒（免疫比濁法）
銅（Cu）測定試劑盒（絡合比色法）
α-巖藻糖苷酶（AFU）測定試劑盒（速率法）
植物25羥基D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA 試劑盒
Human ai endomysial aibody IgA (EMA IgA) ELISA Kit 人抗肌內膜抗體IgA(EMA IgA)試劑盒
PorcineIerferonα,IFN-αELISAKit 豬α干擾素(IFN-α)試劑盒 進口分裝
ADVIgM腺病毒IgM混合型(間接法二步法)
血液合成酶總活性比色法定量試劑盒20次
Mousesolublemyosinheavychain2,sMHC-2ELISAKit小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)試劑盒
PE-Cy7標記人CD44單克隆抗體
G蛋白偶聯受體C5L2蛋白抗體
DDR2重組食蟹猴 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白 Protein
Klf4 (Kruppel likefactor 4 0.5mgKlf4 (Kruppel likefactor 4) 腸道內富含的Kruppel樣因子抗原
BID重組人 BID 蛋白 Protein
ACBD7 Protein Human 重組人 ACBD7 蛋白 (His 標簽)
PILRB Protein Mouse 重組小鼠 PILRB1 蛋白
Klf4 (Kruppel likefactor 4 0.5mgKlf4 (Kruppel likefactor 4) 腸道內富含的Kruppel樣因子抗原
ACBD7 Protein Human 重組人 ACBD7 蛋白 (His 標簽)
DDR2重組食蟹猴 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白 Protein
PILRB Protein Mouse 重組小鼠 PILRB1 蛋白
BID重組人 BID 蛋白 Protein
小鼠乳腺上皮細胞大鼠分泌型卷曲相關蛋白2(SFRP2)試劑盒 ，英文名： SFRP2 ELISA Kit
Rat beta thromboglobulin / beta thrombus protein (beta -TG) ELISA Kit 大鼠β血小板球蛋白/β血栓環蛋白(β-TG)試劑盒
RatIerleukin9,IL-9ELISAKIT 大鼠白介素9(IL-9)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforDPPIV(MousedipeptidylpeptldaseIV)ELISAKit小鼠二肽基肽酶Ⅳ
細胞茜素紅(ALIZARIEDS)鈣染色試劑盒50次
Rathemeoxygenase2,HO-2ELISAKit大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)試劑盒
原代細胞的培養條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發生脫落，漂浮；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
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