操作步驟:

1）使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。
2）根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內。
3）加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
4）甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
5）每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6）甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
7）每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
8）取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。
9）在450nm波長處測定各孔的OD值。

試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關，我司嚴格按照進行，已獲得國家承認的“三證”，每一個產品都有對應的批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產品，不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應微孔內的溫度較快地達到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內源性干擾因素：包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類風濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標本用聯有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測抗原時，可用加入到標本稀釋液中使RF降解；
補體的控制方法：
①用EDTA稀釋標本；
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活；
2.外源性干擾因素：包括標本溶血、細菌污染、保存時間過長或凝固不全等；
控制方法：采血時規范操作，采集的血液勿用力震蕩，以防溶血；收集標本時采用無菌試管，經檢測后再低溫凍存；保存時間不宜過久，檢測時盡量采用新鮮標本；對于凝固不全的血標本可適當加入抗凝劑，并放入37℃水中1 h，待充分凝固后再離心分離血清。

具有如下優點：
一、高效、靈敏、特異的抗體；
二、穩定的重復性和可靠性；
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型；
五、性價比非常好，節省實驗經費。

BAG2Bcl-2結合抑凋亡蛋白2抗體規格:0.1ml三氟-絡合物(>98.0%(W))BoronTrifluoride-EthylEtherComplex

BMyB轉錄因子MYB相關蛋白B抗體規格:0.2mlHeadpin/SERPINB13絲氨蛋白酶抑制13抗體規格:0.2ml鹽氟桂利FlunarizineHydrochloride

大鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA試盒英文名：TLR-9/CD289ELISAKit1,9-雙(酰基)壬(含穩定MEHQ)(>92.0%(GC))1,9-Bis(acryloyloxy)nonane(stabilizedwithMEHQ)

大鼠細胞因子信號轉導抑制因子3(SOCS-3)ELISA試盒英文名：SOCS-3ELISAKit4-亞基-4'-戊(>98.0%(T))4-Butoxybenzylidene-4'-pentylaniline

SynCAM細胞粘附分子1抗體規格:0.1mlN-酰-L-賴氨/N6-三氟酰基-L-賴氨N-6-Trifluoroacetyl-L-lysine

亮綠酚紅乳糖瓊脂鴨跖草（標準品）V

大鼠白介素8受體β(IL8Rβ)ELISA試盒英文名：IL8RβELISAKitN-基喹平QuetiapineN-Oxide

ELISAKitforDopamine78-5000pg/mL檸檬鐵銨Ammomiumferriccitrate

Synaptotagmin-4突觸結合蛋白4抗體規格:0.1mlBOC-L-天門冬酰4-硝酯Nα-Boc-L-Asparagine4-nitrophenylester

釀酒酵母Saccharomycescerevisiae熱帶假絲酵母Candidatropicalis丹曲林鈉半七水合物Dantrolene,SodiumSaltHemiheptahydrate

Poly-D-lysine溶液戊糖桿菌LactobacilluspentosusN-去基加蘭他敏-O-基-d3N-DesmethylGalanthamine-O-methyl-d3

人淋巴細胞功能關聯抗原1α(LFA1α)ELISA試盒0.312-20ng/mLBsp19IBsp19I

TRAF1瘤壞死因子受體相關因子1抗體規格:0.2mlDogIgM/Cy3Cy3標記的兔抗犬IgM抗體規格:0.1ml滅草煙,咪煙Imazapyracid

小鼠趨化因子5(CCL5/RANTES)ELISA試盒英文名：CCL5/RANTESELISAKit物質P（5-11）/七-物質PSubstanceP(5-11)/Hepta-SubstanceP
HIS elisa試劑盒規格1gAnti-GIP/FITC  熒光素標記胃泌素抑制肽抗體IgG

規格200mgAnti-TNFRSF18/FITC  熒光素標記糖皮質激素誘導腫瘤壞死因子受體抗體IgGAmobarbital CII

CDC4MITF相關轉錄因子抗體

Cell adhesion molecule 4雷帕素靶蛋白抗體

CAMTA1粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗體

CDK5RAP3粘蛋白4抗體

CENPHv-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌基因同源物A抗體

Cystatin E基質金屬蛋白酶-10抗體

CA10突變型P53抗體

IL-18R alpha/CD218a蜜蜂微孢子蛋白抗體 規格500mgAnti-GIG8/ID2/FITC  熒光素標記DNA結合抑制因子2抗體IgGAmodiaquine Hydrochloride

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
 2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.溫浴 
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌 
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板 
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。