詳細介紹
小鼠促有絲分裂因子英文名稱:MF/MPF ELISA Kit產品別名:小鼠MF/MPF elisa試劑盒用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。
產品名稱 | |
英文名稱 | MF/MPF ELISA Kit |
貨號 | CS-E3451 |
試劑配制:
1、酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本處理及要求:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過一夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
4. 細胞培養物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
注意事項:
1.使用前請保存在2-8℃。復溶后的標準品若未用完,請廢棄。
2. 微量試劑運輸中顛簸和可能的倒置,會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請1000轉/分離心1分鐘,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結晶,屬于正常現象,微加熱至40℃使結晶*溶解后再配制洗滌液。
(加熱溫度不要超過50℃)使用時洗滌液應為室溫。
4. 不同批號的試劑盒組份避免混用(洗滌液和反應終止液除外)。
5. 充分輕微混勻對反應結果尤為重要,使用微量振蕩器,如無微量振蕩器,可在反應孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗中標準品和樣本檢測時建議作雙孔檢測。
7. 試驗中所用的試管和吸頭均為一次性使用,嚴禁在不同的液體之間混用!否則將影響試驗結果。
8. 試驗中請穿著試驗服并帶乳膠手套做好防護工作。特別是檢測血液或者其他體液標本時,請按國家生物試驗室安全防護條列執行。
以下是公司正在*的產品:
生物活性測定陽性對照標準品Anti-Angiotensin I 血管緊張素I抗體
生物素標準品Anti-AT1R/AGTR1 血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體
比立登標準品Anti-AT1R (Whole serum) 血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體
鹽酸比立登標準品Anti-AT1R/AGTR1 血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體
比沙可啶標準品Anti-ATF1 活化轉錄因子1抗體
馬來酸二基己酯標準品Anti-ATF2 活化復制因子2抗體
雙去氧基姜黃素標準品Anti-phospho-ATF2(Ser490/498) 酸化活化復制因子2抗體
小鼠促有絲分裂因子ELISA試劑盒枸櫞酸鉍標準品Anti-phospho-ATF2(Thr69/71) 酸化活化復制因子2抗體
式碳酸鉍標準品Anti-ATF3 活化轉錄因子3抗體
紫外光吸收UV-360標準品Anti-ATG1/ULK1 自噬相關蛋白1抗體
紫外線吸收UV-329標準品Anti-Phospho-ULK1 (Ser467) 酸化自噬相關蛋白1抗體
二氧化鈦溶液混合物標準品Anti-ATG7 自噬相關蛋白7抗體
富馬酸比索洛爾標準品Anti-ATF4/CREB-2 活化轉錄因子4抗體
波生坦標準品Anti-ATM 毛細血管擴張性共濟失調癥突變蛋白抗體
黑升提取物標準品Anti-ATP2c1 鈣離子ATP酶通道蛋白抗體 2-基間苯二酸[APAF1試盒ELISA]
3-基-4-噠嗪羧酸[anti-typhus-Ab試盒ELISA]
2--5--3-三氟基啶[anti-tox IgM試盒ELISA]
3-氟-4-氧代啶-1-酸叔酯[anti-Sa-Ab試盒ELISA]
5-基-3-氟苯腈[anti-RV IgM試盒ELISA]
5-嗪-2-羧酸酯[anti-Q-Ab試盒ELISA]
5-嗪-2-羧酸酯[anti-RV IgG試盒ELISA]
1-戊基-3-(1-萘酰基)吲哚[anti-PIV IgM試盒ELISA]
2--3-基啶[anti-PIV IgG試盒ELISA]
恩替卡韋一水合物[anti-HAV試盒ELISA]
5-氧基酸[anti-HCV試盒ELISA]
戊酸酐[anti-HDV試盒ELISA]
4-啶-2-基酸叔酯[anti-IgA-Ab試盒ELISA]
4,5-二茴酸[anti-Ku-Ab試盒ELISA]
2-基-3-苯酸[anti-Mi2-Ab試盒ELISA]
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。