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50T-頭孢霉屬通用探針法熒光定量PCR檢測試劑盒
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  • 50T-頭孢霉屬通用探針法熒光定量PCR檢測試劑盒

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貨物所在地: 上海上海市
地: 進口、國產
更新時間: 2025-03-22 21:00:07
期: 2025年3月22日--2025年9月22日
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產品簡介

頭孢霉屬通用探針法熒光定量PCR檢測試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應,具有廣泛的用途。

詳細介紹

產品特征:
靈敏度高:能對低拷貝或多樣性模板進行定量。
特異性強:采用熱啟動酶的激活機制,抑制非特異性擴增 。
重復性好:擴增曲線重合度高,受干擾影響少。
擴增效率高:擴增曲線Ct值低,起峰快,效率高。
原理:
所謂實時熒光定量PCR技術,是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。產品僅用于科研

產品名稱

頭孢霉屬通用探針法熒光定量PCR檢測試劑盒

英文名稱

Cephalosporium spp.

貨號

CP934049

頭孢霉屬通用探針法熒光定量PCR檢測試劑盒熒光定量PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
檢測方法:
1.Ⅰ法:
在PCR反應體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后,發射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加*同步。
定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法:
探針完整時,產品僅用于科研報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監測系統可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現了熒光信號的累積與PCR產物的形成*同步。

需要自備的器材:

1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器(2 µL、20µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
具有下列特點:
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。
2. 引物經過優化,特異性強。預期的 PCR 產物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗結果。
以下是
頭孢霉屬通用探針法熒光定量PCR檢測試劑盒的相關產品:

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異氰酸正酯人甘露糖結合蛋白/甘露糖結合凝集素(MBP/MBL)

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beta-Amyloid(1-40)  β淀粉樣肽(1-40)抗體蔓荊子黃素

beta-Amyloid(1-28)  β淀粉樣肽(1-28)抗體石吊蘭素

beta-Amyloid(1-16) (human)  β淀粉樣肽(1-16)抗體(人)茴香醚

beta-Amyloid(1-16)  β淀粉樣肽(1-16)抗體次野鳶尾黃素

beta-Amyloid 1-40(CT)  β淀粉樣肽1-40(C端)抗體龍血素B

beta-Amyloid 1-40(CT)  β淀粉樣肽 1-40(C端)抗體劍葉龍血素C

beta-Actin (Loading Control)  β-肌動蛋白抗體(內參抗體)金利油

Beta-2-MG(B2E5)  β2微球蛋白抗體(單抗)辛夷脂素

Beta galactosidase  β半乳糖苷酶抗體丹酚酸B

Beta galactosidase  β半乳糖苷酶抗體荷葉堿

beta COP  β衣被蛋白抗體雷公藤素(雷公藤內酯醇)

beta Bax/BCL2 associated X protein  BCL2相關X蛋白抗體烏藥醚內酯

beta Adaptin/AP2  銜接蛋白β抗體異鼠李素-3-O-新橙皮苷

beta 2 Microglobulin  β2微球蛋白抗體遠志皂苷元

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