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卡氏肺孢子蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒

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具體成交價以合同協議為準
  • 型號 50T
  • 品牌 其他品牌
  • 廠商性質 經銷商
  • 所在地 上海市

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更新時間:2020-06-02 11:31:49瀏覽次數:789

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產品簡介

CAS 詳見說明書 純度 詳見說明書
分子量 詳見說明書 分子式 詳見說明書
供貨周期 現貨 規格 50T
貨號 CP934605 應用領域 化工
主要用途 公司產品僅用于科研    
卡氏肺孢子蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應,具有廣泛的用途。

詳細介紹

產品名稱

卡氏肺孢子蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒

英文名稱

Pneumocystis carinii

貨號

CP934605

儲存條件:

14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

探針法:

卡氏肺孢子蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴增相關。它與目標序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端。當完整的探針與目標序列配對時,熒光基團發射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進行延伸反應時,聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進行酶切,使得熒光基團與淬滅劑分離。隨著擴增循環數的增加,釋放出來的熒光基團不斷積累。因此熒光強度與擴增產物的數量呈正比關系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準確性。
使用方法:
一、樣品DNA的制備
用自選方法提取細菌樣品DNA。注意:DNA純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA,后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備O157:H7標準曲線(以10-10E6這6個10倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DN段作為陽性對照。
1. 標記6個離心管,分別為6,5,4,3,2和1號。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用TE緩沖液或超純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至10E7拷貝/μL,建議每次稀釋10倍,梯度稀釋至10E7拷貝/μL)。
4. 在6號管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得10E6拷貝/μL的陽性對照。
5. 換槍頭,從6號管中取5 μL溶液到5號管中,充分震蕩1分鐘,得10E5拷貝/μL的陽性對照。
6. 換槍頭,從5號管中取5 μL溶液到4號管中,重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。
7. NC管中不加任何陽性對照。
8. 從1-6號管中分別取5 μL和待測樣品一起進行定量PCR(見下步),每個樣品做3次重復。PCR后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光PCR Ct值,并以之為縱軸,以濃度的對數值為橫軸,繪制標準曲線。
探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖:

應用案例:
樣品 DNA 的制備
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DN段作為陽性對照。
2.標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
8.重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設置 qPCR 反應(20  μL 體系,在樣品制備室進行)
9.在 PCR 管中加入下列成分。
以下是公司正在銷售的產品:

VSIG4  T淋巴細胞負調節蛋白抗體小鼠5羥色胺(5-HT)ELISA試盒

VRK1  牛痘病相關激酶1抗體(絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶VRK1)小鼠5羥基吲哚酸(5-HIAA)ELISA試盒

VPS4a  液泡分選蛋白4抗體小鼠5羥二十碳四烯酸(5-HETE)ELISA試盒

VPS18  空泡分選蛋白18抗體小鼠5核苷酸酶(5-NT)ELISA試盒

VP2  重組豬細小病VP2蛋白抗體小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA試盒

VNN1  血管非炎癥分子1抗體小鼠4-羥基壬烯酸(HNE)ELISA試盒

VMAT2  腦單胺類神經遞質轉運蛋白抗體小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢP)ELISA試盒

卡氏肺孢子蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒VMAT1/VAT1  嗜鉻顆粒胺轉運蛋白VAT1抗體小鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)ELISA試盒

VLDL Receptor  極低密度脂蛋白受體抗體小鼠Ⅲ型前膠原(HPCⅢ)ELISA試盒

Vitamin D Receptor/VDR  維生素D3受體抗體小鼠Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA試盒

Vitamin D Binding protein  維生素D結合蛋白抗體小鼠3-硝基酪氨酸(3-NT)ELISA試盒

Visfatin-1(CT)  內脂素/內臟脂肪素(C端抗體)小鼠3-α羥基類固醇脫酶(Akr1c9)ELISA試盒

Viperin/RSAD2  病抑制蛋白Viperin抗體小鼠3-O-基多巴(3-OMD)ELISA試盒

VIP receptor 2/VPAC2  腺苷酸環化酶激活肽受體-II/血管活性腸肽受體-II抗體小鼠Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)ELISA試盒

VIP Receptor 1/VAPC1  血管活性腸肽受體-1抗體小鼠Ⅱ型膠原C端肽(CTX-Ⅱ)ELISA試盒安西奈德 Amcinonide51022-69-650mg,供HPLC法含量測定用

安妥沙星 Antofloxacin100mg/支,供HPLC含量測定用

艾司奧美拉唑鈉 Esomeprazole Sodium161796-78-750mg/支,IR鑒別

艾司奧美拉唑鈉 Esomeprazole Sodium161796-78-750mg/支,IR鑒別

艾普拉唑磺酰化物(艾普拉唑雜質A)-2-{[(4-氧基-3-基)-2-吡啶基]基}-磺酰基-5-(1-吡咯-1-基)-1-苯并咪唑供檢查用

艾普拉唑磺酰化物(艾普拉唑雜質A)-2-{[(4-氧基-3-基)-2-吡啶基]基}-磺酰基-5-(1-吡咯-1-基)-1-苯并咪唑供檢查用

艾普拉唑 Ilaprazole10mg,供HPLC含量測定用

艾普拉唑 Ilaprazole10mg,供HPLC含量測定用

癌胚抗原(CEA)3支/套,0.5ml/支,供免疫測定用

癌胚抗原(CEA)3支/套,0.5ml/支,供免疫測定用

注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

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