軟瓊脂克隆形成服務實驗步驟

1.獲取樣本，培養細胞，

2.調整細胞懸液密度為1x103個/ml細胞。

3.制備底層瓊脂，溶化的5%瓊脂和 37℃ 左右預溫的新鮮培養液以1:9比例在 40℃ 均勻混合，加入培養皿(直

徑 60mm)中，每皿含0.5%瓊脂培養基2ml，室溫下瓊脂凝固。

4.制備上層瓊脂 37℃ 密度每川含200個的細胞懸液1.5ml移入小燒杯中，加入 40℃、5%瓊脂等體積混勻，即成0.25%半固體瓊脂培養基。配好的半固體瓊脂培養其立即加入鋪有底層瓊脂的培養用中，率溫下瓊脂凝固。37℃，5%CO2靜罟培養2-3周。

5.當培養血中出現肉眼可見克降時，終止培養，棄去培養液，PBS液小心浸洗2次，空氣干燥，甲醇固定15分鐘，棄甲醇空氣干燥，用Giemsa染液染色10分鐘，流水緩慍洗去邊液，空氣干燥。

軟瓊脂克隆形成服務:伊萊博生物擁有專業的技術支持和實驗操作人員團隊，核心成員來自中科院、復旦、交大、同濟等國內重點高校及科研機構，能夠提供前沿的、完善的實驗技術咨詢與服務。為了響應國家大力發展基礎研究的號召，推動實驗科學領域的進步，伊萊博生物充分利用積累多年的科研資源優勢，為廣大科研工作者提供實驗技術培訓服務，從理論和實操兩個部分，培養其科研思維以及解決問題的能力，為今后的科研工作奠定堅實的基礎。