動物皮下成瘤實驗

動物類型：裸鼠

造模試劑：腫瘤細胞或腫瘤組織塊

造模方法：一般是皮下注射成瘤（腋下或背部皮下 ）

接種細胞密度1*10^6~5*10^7cell/ml，接種0.1ml~0.2ml，就是將培養的細胞收集起來調整到適宜濃度重懸于不含血清的培養液或PBS中，放于冰盒中攜至動物房，直接注射即可。

死亡率：10%，成功率：90%左右

動物皮下成瘤實驗技巧

1、細胞狀態是成瘤實驗的關鍵，所以細胞生長狀態一定要好，取處于對數生*的細胞，細胞達80-90%左右密度為宜;收集細胞前一天晚上更換新鮮培養基。
2、消化細胞后用預冷的PBS洗兩遍，目的為去除細胞中的血清。
3、用PBS或者無血清培養基吹打細胞沉淀至合適的濃度，一般皮下瘤接種的細胞量為1-5×10^6個細胞/支，接種體積為0.1ml，因此細胞懸液的濃度為1-5×10^7個細胞/ml。
4、細胞消化后應盡快接種到裸鼠皮下，一般盡量在半小時內完成，途中將細胞懸液放在冰上降低細胞的代謝。
5、選擇的裸鼠一般在5-8周齡，體重18-20g左右，種植部位選擇血供豐富區域，如腋窩中后部、腹股溝中上部。
6、接種前用槍將細胞懸液充分的吹散，防止細胞成團而降低細胞成活率。
7、接種時，針頭在皮下進針深一點，約1cm深，減少注射后細胞懸液從針眼溢出。
8、如何抓牢裸鼠?左手拇指和食指捏緊裸鼠頸背部皮膚，小拇指夾住裸鼠尾巴。