如何選擇透析袋?我來告訴你!
閱讀:5509 發布時間:2015-5-10
一、透析袋的區別 | |||||||||||||||||||
纖維素透析袋 | 再生纖維素透析袋 | 普通型透析袋 | |||||||||||||||||
分子量 | 100-500,500-1000,5k,10k,20k,50k,100k,300k | 1k,2k,3.5k,8k,10k,25k,50k | 3.5k,7k,8-14k | ||||||||||||||||
化學兼容性 | 適用于:甲醇,乙醇和異丙醇等低碳醇(短時間、低濃度)。不適用于:強極性溶劑(如丙酮,甲乙酮,二惡烷) | 適用于:烴,鹵代烴,醇,酮,酯,氧化物,含氮溶劑。不適用于:鹽酸(濃度>25%),硝酸(濃度>25%),96%硫酸,25%高氯酸,1N氫氧化鉀和10%的苯酚水溶液。 | 與很多鹽兼容,比如CaCl2、(NH4)2SO4,還可與分子生物學和酶學常用的水溶劑和有機溶劑兼容,如異丙醇、乙醇、丙酮。 | ||||||||||||||||
有機抗性 | 中等 | 好 | 好 | ||||||||||||||||
污染物水平 | 不含重金屬和硫化物 | 不含重金屬和硫化物 | 硫化物<0.3%,重金屬<50ppm | ||||||||||||||||
包裝 | 濕型,0.05%* | 濕型,0.05%* | 干型 | ||||||||||||||||
扁平寬度 | 10,16,24,31mm | 10,12,18,24,28,38,45,50,53mm | 25,34,44,77mm | ||||||||||||||||
PH范圍 | 2-9 | 2-12 | 5-9 | ||||||||||||||||
溫度限度 | 37℃ | 60℃ | 可煮沸,可高壓滅菌 | ||||||||||||||||
預處理 | 無需預處理,只需用蒸餾水清洗即可使用 | 無需預處理,只需用蒸餾水清洗即可使用 | 在沸水或 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中將透析袋煮沸10分鐘 | ||||||||||||||||
二、透析袋應用: | |||||||||||||||||||
去除鹽類,表面活性劑和溶劑 | |||||||||||||||||||
樣品溶液的緩沖液置換和PH值的調節 | |||||||||||||||||||
濃縮蛋白質,多肽和抗體 | |||||||||||||||||||
DNA電洗脫 | |||||||||||||||||||
電泳前稀釋蛋白的制備 | |||||||||||||||||||
小分子污染物清除 | |||||||||||||||||||
結合研究 | |||||||||||||||||||
組織培養的提取純化 | |||||||||||||||||||
三、透析袋的選擇: | |||||||||||||||||||
正確選擇合適的截留分子量 | |||||||||||||||||||
截留分子量的選擇是以預留在膜內的大分子的分子量和將要被除去的小分子污染物的分子量為基礎的。為達到合理有效的分離,需分離的兩種物質分子量的比率至少為25. | |||||||||||||||||||
選擇截留分子量的經驗法則:選擇截留分子量值約為要保留的大分子分子量的一半,以獲得至少90%的保留率。 | |||||||||||||||||||
正確選擇扁平寬度 | |||||||||||||||||||
透析袋扁平寬度的選擇取決于樣品體積和透析容量。較小的透析管透析更快;較大的透析管因擴散距離較長透析較慢。為易于使用,建議使用總長(包括閉合夾和頂部空間)為大約10-15厘米的透析袋 | |||||||||||||||||||
透析袋的化學相容性 | |||||||||||||||||||
化學相容性主要用作使用指導,不作為化學相容的保證。溫度,濃度,長時間曝光等因素的改變可能影響產品的使用。建議您自設條件進行測試。 | |||||||||||||||||||
四、透析袋的使用: | |||||||||||||||||||
下述透析程序是一個普遍的基礎透析過程。在開始透析之前應考慮到許多變數。透析樣品溶劑、膜的化學相容性、膜的截留分子量,透析溶劑、透析體積、溫度等變量都會影響透析速率,因此,一些應用中下述透析過程可能需要適當的變化。 | |||||||||||||||||||
1. 把適量的透析液(緩沖液)加入透析裝置。透析液的體積應為樣品體積量的100倍。(例如:在一升透析液中透析10毫升的樣品) | |||||||||||||||||||
2. 裁剪適當長度的透析管。預留一段額外長度(約占總樣品體積量的20%)作為頭部空間。 | |||||||||||||||||||
3. 把透析管插入打開的透析夾,在約超出透析夾3-5毫米的位置再夾住。不要折疊透析袋。 | |||||||||||||||||||
4. 由透析管開口端將樣品裝入。調整一下頂部空間的長度,夾緊透析夾。 | |||||||||||||||||||
5. 把透析樣品放在合適的透析緩沖液中。 | |||||||||||||||||||
6. 透析要根據具體的應用需求。通常情況下,允許24小時透析。在持續透析的過程中,至少要進行3次全部更換透析液。建議在(透析后)2-4小時,6-8小時和10-14小時(第2天早晨)更換透析液。在zui后一次透析液的更換后要至少繼續進行2小時的透析。 | |||||||||||||||||||
注:對于高濃度污染物,樣品可能需要較長的時間透析,透析液需要更頻繁的更換。 | |||||||||||||||||||
7. 透析溫度主要取決于樣品。溫度限制主要取決于膜的類型。纖維素透析袋可以承受的溫度高達37℃,再生纖維素透析袋可以承受的溫度高達60℃。 | |||||||||||||||||||
五、透析袋的貯存和保質期: | |||||||||||||||||||
在適當的儲存情條件下,保質期為兩年。干燥的透析袋要在室溫或4℃儲存在聚乙烯袋中。未開封的透析袋4℃儲存。一旦變濕,透析袋應浸泡在下列之一的溶液中:0.05%*,1%的苯甲酸鈉或1%甲醛。(備注:一旦變潮濕,不要讓透析袋干燥。不斷干燥會造成孔隙結構不可恢復的倒塌) |