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稱取本品0.4g，加入0.5g L-氨基酸（或鹽酸鹽），溶解于100mL蒸餾水中，用1mol/L的鹽酸或氫氧化鈉調節pH，使滅菌后在6.8左右（不同形式的氨基酸pH不同，因此加入氨基酸后需對培養基的pH進行調整），分裝于試管，并覆蓋液體石蠟，121℃滅菌15min，冷卻后備用。

注意事項：1.氨基酸有L型和D型，通常需要使用的是L型氨基酸，若使用的氨基酸為L型D型混合的，配制培養基時需將氨基酸的量加倍（即添加量為1g/100mL）；2.不同的氨基酸pH有差異，一般呈堿性，但市場上售賣的氨基酸多為鹽酸鹽形式（鹽酸鹽形式的氨基酸更為穩定，不易變質），一般呈酸性，因此配制培養基時，加入氨基酸后必須對培養基的pH進行調整；3.在厭氧環境下更有利于保存細菌分解葡萄糖產生的酸，及促進氨基酸脫羧酶的產生，因此需覆蓋液體石蠟隔絕氧氣，不覆蓋石蠟有可能導致結果不正確。4.有些細菌的氨基酸脫羧酶產生較慢，因此在遇到陰性試驗結果時，有時需延長培養數天才可觀察到陽性結果。5.本試驗的原理是細菌前期分解葡萄糖產酸，后期分解氨基酸產堿，培養基呈現由紫色變黃再變紫的過程，最終陽性結果為紫色，但有些細菌不能分解葡萄糖產酸，培養基全程都是紫色，此時容易誤判為陽性結果，因此在進行氨基酸脫羧酶試驗是，需要同時接種對照管（即不添加氨基酸的培養基管），當對照管與試驗管均為黃色時為陰性反應，當對照管為黃色，試驗管為紫色時，為陽性反應，若對照管未變黃，說明細菌為產堿型或氧化型，不能直接判斷陰陽性。