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培養基保存的注意事項
閱讀：510 發布時間：2024-5-14一、商品化脫水干燥培養基的保存
（1）濕度：干粉培養基具有很強的吸濕性，因此必須在保存的干燥的環境中，特別是已經開瓶的培養基，需要盡可能在濕度低的環境中密封保存。如保存過程中發現培養基出現吸潮結塊、粘稠變色等現象，則不能使用。
注：有些培養基因干粉中添加了吐溫80（如MRS培養基）等液體成分，粉末略有粘連或小塊狀，可以輕松壓碎，并非吸潮導致，不影響使用。
（2）溫度：多數商品化脫水培養基可常溫保存（一般指10-30℃）或陰涼處保存（一般指不超過20℃），對于含不穩定成分的培養基（如某些抗生素、顯色底物等），可在2-8℃冷藏保存。保存溫度過高易導致某些不穩定成分變性或降解。
（3）光照：所有培養基都應避免陽光直射，置于暗處保存，含對光敏感成分的培養基應采取必要的遮光措施保存。
小結：環境的濕度、溫度和光照是影響培養基保存期限的主要因素，未開封的商品化培養基應按照說明置于相應的條件下保存，已開封的培養基應采取適當的密封措施，或盡可能降低保存環境的溫度與濕度，更有利于培養基的保存。
二、實驗室自制培養基的保存
在實驗室中，有時配制的培養基用不完，需要存放下次使用，有時候需預制大量培養基待用，經常會遇到半成品培養基的保存問題。決定半成品或成品培養基效期的主要因素是光澤、穩定和密封性。
（1）成分簡單的純營養類培養基（如只含蛋白胨、氯化鈉、磷酸鹽等成分相對穩定的培養基，營養肉湯、LB肉湯、緩沖蛋白胨水等）：這些培養基相對穩定，通常室溫可保存數天或數周，若密封避光冷藏保存，通常可保存數月。
注：固體培養基用前可水浴加熱或用微波爐溶化，通常只能溶化一次，反復的加熱溶化會導致營養降低和瓊脂變軟。
（2）需添加不穩定成分的不完整培養基（如添加卵黃的MYP、添加羊血的血瓊脂、添加抗生素的培養基等）：可將未添加不穩定成分的基礎培養基在室溫（通常可保存數天）或冷藏密封（通常可保存數周或數月）保存，臨用前再加入不穩定成分制成完整培養基。若已加入不穩定成分，應在2-8℃冷藏保存，盡快使用。
注：一些液體培養基可以冷凍保存，融化后不影響使用，但含瓊脂的培養基不可以冷凍，結冰會破壞瓊脂結構；固體的培養基在使用前需加熱溶化后再加入不穩定成分，加入不穩定成分后不可再加熱。
（3）只能加熱滅菌或過濾除菌的培養基（如XLD、亞XI酸鹽胱氨酸增菌液等，含不耐熱成分）：此類培養基相對較不穩定，建議現配現用，或2-8℃冷藏保存數日。
三、商品化即用型培養基
（1）試管或液體瓶裝培養基、均質袋等：商品化的即用型通常采取了有效的滅菌方式和密封保存，未開封前按說明保存即可；若已開封，應做好有效措施防止污染，密閉保存，含不穩定成分的應冷藏保存。
注：一些含染料或酸堿指示劑的培養基應注意避光保存，如煌綠乳糖膽鹽、RV肉湯、乳糖蛋白胨等培養基，長時間見光易發生變色。
（2）瓊脂斜面、平皿等：大多數商品化的瓊脂培養基建議保存在20℃左右的環境中，含不穩定成分的瓊脂培養基可置于5℃左右的冷庫中保存。
① 目前市場上大多數的平皿保存溫度都寫室溫或5-25℃的一個很寬的保存范圍，但在實際保存過程中受水份蒸發和冷凝水的影響，建議保存在20℃左右效果更佳，溫度過低易出現冷凝水，溫度過高易導致培養基失水。
② 不建議使用冰箱保存。冰箱的溫度相對不恒定，制冷過程中溫度偏低易起霜，易導致培養基結冰，長期在冰箱中保存易導致瓊脂出現冰晶，結構被破壞。若要使用冰箱，建議將培養基放置在遠離制冷或貼壁的位置，冷藏溫度盡量調高一些。
③ 拆封后的平皿不易久存，因為在非密閉環境中平皿易逐漸失水變薄。
（3）即用型生化管、鑒定條等：一些成分簡單的生化管（如蛋白胨水、嗜鹽性胰胨水等）可在室溫條件下存放較長時間，含酸堿指示劑的需要避光保存，在冷藏條件下可保存更長時間。
（4）試劑盒、染色液等：建議按照說明書保存，冷藏條件更穩定。
總結：低溫、避光、密封和生產工藝是決定即用型培養基有效期長短的關鍵外在因素。對于含不穩定成分的培養基，低溫、避光是延長有效期的重要手段；對于含瓊脂的培養基，在冷藏時需注意不可使培養基結冰。
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