技術文章
使用超彈性骨的生物打印骨組織
閱讀:116 發布時間:2024-2-4
概述
超彈性骨™是由 Dimension Inx 制成的一種材料,由超過 90% 的羥基磷灰石組成,羥基磷灰石是一種來自骨組織的天然礦物質。超彈性骨™在室溫下打印,打印后可以接種細胞。使用此分步方案使用超彈性骨骼對骨組織進行生物打印。
下面用戶說明中提供的推薦制劑產生了一種簡化的可打印生物材料,可創建可重復的 3D 生物打印結構。但是,用戶可以根據自己的需要修改準備工作。
材料
3 mL Dimension Inx 超彈性骨™(注:本產品已停售)
生物墨水混合器
5 mL 注射器
14G金屬拉絲針
27G金屬印針
砂紙印刷面
間充質干細胞
間充質干細胞生長培養基
骨組織生物打印方法
印刷:
將小瓶從 4°C 中取出,使其達到室溫;
材料從冰箱中取出時看起來會變硬,因此在處理之前請等待它看起來是流動的(這可能需要一個多小時,并且根據室溫而有所不同);
使用生物墨水混合器劇烈渦旋材料,直到其均勻(這可能需要幾分鐘);
注意:如果材料溶劑似乎大部分與粉末分離,您可以用膠帶將小瓶固定在渦旋混合器上,并保持至少一小時。長時間混合小瓶將獲得更好的打印體驗。
使用 14G 針頭刺穿樣品瓶蓋并繪制打印量 (3 mL),不要將樣品瓶倒置以防止材料損失。超彈性骨™骼具有高度粘性,因此加載可能需要幾分鐘。我們建議您僅將此樣品瓶用于一次打印會話。如果您將其用于更多會話,請確保將其適當密封。建議將刺破的蓋子換成實心蓋子,以便更好地進一步存放;
拉拔材料后,取下注射器柱塞和拉絲針;
從柱塞上取下塞子并將其放入注射器中;
將塞子放回注射器中,用柱塞推動它,直到它接觸并均勻分布在注射器中的拉出材料。確保在用柱塞推動塞子時,它們不會重新連接;
放置 27G 打印針并裝入您的 Allevi!
將粘合劑打印表面放在培養皿上。
印后:
在處理之前,讓您的打印結構在通風櫥中靜置至少 2 小時。請注意,打印件在洗滌前可以無限期地存放在密封的玻璃容器中;
將打印的結構浸入 70% 乙醇中至少 1 小時。建議輕柔攪拌。更換乙醇,讓您的物體再浸入水中一個小時;
用PBS(用于生物應用的無菌PBS)代替乙醇,并立即使用。如果您想存儲此對象,請將其冷凍在 -20 ?C、– 40 ?C 或 -80 ?C;
如果您沒有使用我們的盤子并且您的結構與您的表面融合,請小心地使用剃須刀片將其取下。如果您確實使用過我們的盤子,只需戴上手套取下您的結構即可;
如果您愿意,您可以用剪刀、手術刀、活檢打孔機等切割您的指紋。
細胞接種:
從打印的結構中吸出多余的液體,但不要讓它干燥。細胞接種時應略微濕潤;
10-15 μL 應接種在直徑 5 mm、厚 1 mm 的印刷構建體中;
凝膠也可以注射到生物打印和洗滌的物體中。
打印設置
速度 (mm/s) | 層高 (mm) | 噴嘴直徑 (mm) | 軌距 |
26 | 0.2 | 0.2 | 27 |
壓力 (psi) | 交聯(秒) | 打印溫度 (°C) |
~30-40 | 0 | 室溫 |
生物打印骨組織的警告
不要將液體形式的超彈性骨™存放在塑料容器中數小時,否則會變干。打印前盡量限制所有空氣暴露,以確保佳打印體驗;
使用比提供的針頭規格更高(噴嘴直徑更小)的針頭進行打印可能會導致間歇性堵塞;
不要讓液體形式的超彈性骨™長時間接觸黑色金屬,它會腐蝕它們。
不要讓超彈性骨™與聚酯或聚苯乙烯接觸,它會與它們融合。
不要讓超彈性骨™達到 70 ?C 以上的溫度,否則它會融化。
不要試圖用熱、蒸汽、環氧乙烷或過氧化氫對打印結構進行滅菌。該材料含有二氯甲烷、2-丁氧基乙醇和鄰苯二甲酸二丁酯。
僅用于研究目的。不供人類或臨床使用。