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制備液相色譜系統(tǒng)的組成部分和原理
閱讀：1760 發(fā)布時間：2024-8-30 制備液相色譜系統(tǒng)是一種用于生物學(xué)、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué)與公共衛(wèi)生學(xué)、藥學(xué)等領(lǐng)域的先進分析儀器。該系統(tǒng)基于液相色譜的原理，通過高壓驅(qū)動流動相通過填充有固定相的色譜柱，利用樣品中各組分在固定相和流動相中的吸附、分配、離子交換等作用的差異，實現(xiàn)對復(fù)雜樣品中各組分的分離和純化。
制備液相色譜系統(tǒng)主要由以下幾個部分組成：
1. 高壓泵：負(fù)責(zé)將流動相以高壓形式輸送到色譜柱。高壓泵的性能直接影響到整個系統(tǒng)的分離效果和穩(wěn)定性。常見的高壓泵有恒流泵、梯度泵等。
2. 色譜柱：實現(xiàn)樣品分離的關(guān)鍵部件，其內(nèi)部填充有固定相。固定相可以是硅膠、聚合物、離子交換樹脂等。根據(jù)固定相的性質(zhì)和作用力，色譜柱可以分為正相色譜柱、反相色譜柱、離子交換色譜柱等。
3. 檢測器：用于檢測經(jīng)過色譜柱分離后的樣品組分，并將其轉(zhuǎn)化為電信號。常見的檢測器有紫外檢測器、熒光檢測器、示差折光檢測器等。紫外檢測器因其廣譜性和靈敏度而廣泛使用，能夠檢測大多數(shù)有機化合物。
4. 餾分收集器：用于收集經(jīng)過色譜柱分離后的各組分。根據(jù)需要，可以選擇手動或自動餾分收集器。自動餾分收集器能夠根據(jù)檢測器的信號自動收集特定組分，提高實驗效率和準(zhǔn)確性。
5. 控制系統(tǒng)：負(fù)責(zé)整個系統(tǒng)的自動化操作，包括泵的流速控制、檢測器的數(shù)據(jù)采集、餾分收集器的自動控制等。現(xiàn)代HPLC儀還配備有微機控制系統(tǒng)，能夠?qū)崿F(xiàn)儀器的精確控制和數(shù)據(jù)處理。
制備液相色譜系統(tǒng)的工作原理如下：
1.高壓驅(qū)動：高壓泵將流動相以高壓形式輸送到色譜柱，使樣品在高壓下通過色譜柱。高壓的作用可以使樣品中各組分的有效擴散距離增大，從而提高分離效果。
2.樣品分離：樣品在高壓作用下通過色譜柱，由于不同組分在固定相和流動相中的吸附、分配、離子交換等作用的差異，實現(xiàn)對復(fù)雜樣品中各組分的分離。
3.檢測與定量：經(jīng)過色譜柱分離后的樣品組分被檢測器檢測，并將其轉(zhuǎn)化為電信號。通過對電信號的處理和分析，可以實現(xiàn)對樣品中各組分的定量分析。
4.餾分收集：根據(jù)檢測器的信號，控制系統(tǒng)可以自動控制餾分收集器的工作，實現(xiàn)對分離后各組分的自動收集。