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技術文章

廣譜型DNA 免核酸提取試劑應用

閱讀:1357          發布時間:2021-7-22

廣譜型DNA 免核酸提取試劑應用

貨號:M-DNA01

試劑盒應用

本試劑盒中采用*配方,能夠快速高效的裂解各種常見樣本,無需反復離心,通過裂解和吸附獲得高質量的DNA。該DNA 無需進行純化可以直接用于PCR、熒光定量PCRSTR 等擴增。DNA Lysis 可用于血樣、唾液、腹水、細胞、組織(例如淋巴結、脾臟、腎臟、肺、肌肉、脊椎、皮膚、尾巴、耳朵等)、拭子(例如血拭子、咽拭子)、DNA 病毒、大腸桿菌、農桿菌、葡萄球菌、環境樣本(例如擦拭物、水樣本、鞋底)、支原體、衣原體以及植物等樣品中基因組DNA 的提取。

本試劑盒僅供研究使用,不可用于臨床、食品、化妝品等領域。

 

試劑盒組成

組分M-DNA010150T M-DNA0102250T

DNA Lysis 1 mL 5 mL

保存條件 4oC 保存。使用前將DNA Lysis 室溫充分混勻。

需要準備 金屬恒溫浴、離心機

 

使用方法

一、不同樣品的處理方法

1. 組織液的處理

1)組織液包括組織研磨液、細胞懸液、血清、血液、唾液、尿液、拭子處理液等。取10 μL組織液置于離心管中。

※:棉簽放入500μL生理鹽水或無菌水中,浸泡5-10min,用力擠壓后溶液取10 μL置于離心管中。

2)加入20 μL DNA Lysis

3)充分混勻。

4)置于55oC 加熱5 分鐘。溶液即為DNA 模板。

2. 組織塊的處理

1)用眼科剪剪取1-2mm 組織塊,并將組織塊剪成肉泥狀。

2)加入20 μL DNA Lysis

3)充分混勻。

4)置于55oC 加熱5 分鐘。

510000rpm 離心2-3 分鐘,取上清。上清即為DNA 模板。

3. 其他樣本的處理

1)菌類包括大腸桿菌、農桿菌、葡萄球菌等。取20 μL DNA Lysis 放置在離心管中。

2)用接種針/牙簽挑取菌斑中一部分,放在(1)中溶液中。如果是培養液,取10μL 放在(1)中溶液中。

3)充分混勻。

4)置于55oC 加熱5 分鐘。溶液即為DNA 模板。

4. DNA 病毒的處理

1)細胞懸液參考“組織液的處理"。

2)病料組織參考“組織塊的處理"。

5. 植物樣品的處理

1)參考“組織塊的處理"。

二、推薦PCR 反應體系

注意事項

一、試劑盒使用前注意事項

1)所有試劑應按照溫度儲存。請勿反復凍融。

2)檢測前后均需要對操作區進行消毒,消毒方式可以采用75%乙醇或核酸消除劑等。耗材均

需使用商品化的無酶耗材。

3DNA Lysis 采用配方,若出現肉眼可見小球狀物質屬于正常現象。

二、試劑盒使用過程中注意事項

1PCR 過程中推薦使用陰性對照和陽性對照。

2)整個過程中使用的吸頭、離心管等耗材應丟棄在含有75%乙醇或核酸消除劑的容器中,防止形成環境污染。

三、試劑盒使用后注意事項

1DNA Lysis 處理后的DNA 模板(除血樣)可在-20℃保存至少1 個月。避免反復凍融,防止基因組斷裂。

2PCR 反應完成后,嚴禁在實驗區開蓋,在污染區進行瓊脂糖電泳,以防止氣溶膠污染。為防止試劑盒污染,請勿將不同批號試劑盒混用。

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